动物PCR扩增

时间:2024年04月02日 来源:

巧亦捷核酸检测一体机的特异性及灵敏度可达99%以上,使用的PCR荧光探针技术不但可以检测出病毒的种类,更可以检测出样品里100个/ul数量级的病毒数量,可谓特异性极强,准确度极高!若检测出有病毒,但没有发病也要引起重视,因为检测的病毒是一些对动物机体伤害极大的病毒,或者是人畜共患病,虽然现在没有发病,并不表明以后不会发病,如果任其在体内发展,等到病毒繁殖到一定的数量后,或者机体的抵抗力突然下降,也许就会发生灾难性的爆发,对动物造成极大的伤害。传染病是由某些具有致病性的微生物,如细菌、病毒等引起的,能够在某种动物或多种动物之间传播的一些疾病。动物PCR扩增

动物PCR扩增,PCR

巧亦捷核酸一体机采用的TaqMan探针法介绍:TaqMan探针法是具有高度特异性的定量PCR技术。它的工作原理是在PCR反应体系中存在一对PCR引物和一条探针,探针的5′端标记有报告基团,3′端标记有荧光淬灭基团,探针只与模板特异结合,其结合位点在两条引物之间。当探针完整的时候,报告基团的荧光能量被淬灭基团吸收,所以仪器搜集不到信号,随着反应的进展,Taq酶遇到探针,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探针切断,导致报告基团的荧光能量不能被淬灭基团吸收,产生了荧光信号,因此信号的强度就代、表了模板DNA的拷贝数。结核PCR仪器分子诊断技术大致划分为PCR技术、分子杂交、基因测序、核酸质谱、生物芯片5大类。

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大多数宠物医院运用的诊断方法为:PCR和试纸条。其区别是:试纸条原理是基于抗体抗原的免疫学方法,通过颜色或荧光标记来判读,和PCR检测是基于不同方法学的检测方式。PCR通过检测样本中有无病毒DNA(RNA)来确诊,灵敏度高、特异性强、支持检测项目多,是人医医学界公认的诊断金标准,两者区别可以理解为滴血认亲(免疫学方法)与亲子鉴定(分子诊断)的区别。目前专业的的宠物疾病机构就是使用PCR检测。巧亦捷核酸检测一体机采用国际**的薄膜微流控技术,实现了从核酸提取、PCR扩增、荧光检测全流程自动化芯片内完成,可以实现专业实验室级别的核酸检测,且检测时间短,全程无需专业技术人员参与,可实现基于病症的多项目联检,更适合宠物医院、兽医站、养殖场等现场快检应用场景。

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。在准确的前提下,高效显得尤为重要。

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目前市面上有很多PCR仪器,一时间让兽医师无从选择,但大多数都是PCR扩增仪,即需要人工进行核酸提取和纯化。他们都有以下痛点:1、核酸提取和纯化的操作麻烦并且需要专业的技术人员和场地,有些还需要配置高速离心机,人工核酸提取需要30~40分钟并容易导致污染。2、人工反复开盖加入或倒出试剂,容易导致人为和气溶胶污染,导致结果不准确。因此针对宠物医院来说,需要一台集核酸提取、纯化和扩增为一体的全自动核酸检测仪。能更好的控制人工成本及试剂成本。PCR在常见传染病、**、遗传病、寄生虫病、优生优育、法医学等领域中有相当高的实际应用价值。江苏分子检测PCR仪器

巧亦捷核酸一体机采用的磁珠法对样本的要求低,可有效去除污染物,避免接下来的PCR反应出现问题。动物PCR扩增

市面上现有PCR仪器都有以下几个弊端:1.由于PCR灵敏度极高,实际应用中污染较严重,一旦有少量外源性污染就可出现假阳性结果。2.条件控制不当会造成各种产物突变,从而降低特异性和灵敏度。3.PCR技术需要以已知DNA模板作为扩充模板,必须知道引物的结合部位序列才能合成特异性引物,局限性较大。巧亦捷核酸一体机采用薄膜微流控技术,检测过程为全封闭且自动进行核酸提取及PCR扩增,无需高标准的检测环境,可很大程度上降低污染。结果快速、准确且稳定。动物PCR扩增

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