吉林推荐的eae模型如何构建

时间:2024年04月17日 来源:

通常不同品种动物对同一抗原的敏感性不同、不同抗原的抗原性也不同,并且不同来源的同一抗原的活性也有明显差异。一般情况下,抗原性强弱依次为豚鼠脊髓>大鼠脊髓>牛脊髓,脊髓组织>脑组织,豚鼠MBP>牛MBP。蛋白或多肽单体不但结构明确,而且可以精确定量,因此利于进行EAE发病机制研究,但不易获得。脊髓匀浆和脑组织匀浆两种抗原均含有多种抗原表位,且易于获得,适用于多种动物,但其成分复杂,不易精确定量,这给某些特殊研究造成不便。诱导鼠类产生EAE模型的异种抗原,以新鲜豚鼠脊髓制备的抗原佐剂乳化物为比较好。在一定范围内抗原的量和EAE的发病率及发病程度有相关性,注射抗原佐剂乳化物的剂量越大,EAE的发病率越高。抗原的剂量可因动物的品系、抗原种类、免疫方法、研究目的等的不同而有很大变化。另外,抗原的物理状态也很重要,高分散度的抗原易于被吞噬和递呈,进而较高效率地***免疫系统。EAE模型是由针对CNS髓鞘发生免疫攻击的CD4+Th1细胞介导的自身免疫性疾病。吉林推荐的eae模型如何构建

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常用的致敏抗原有髓鞘碱性蛋白(MBP)或其多肽片断(如MBP peptide 89—101)以及蛋白脂(PLP)等。长期以来MBP和PLP被认为是引起EAE和MS的主要抗原,MBP是髓鞘中抗原性比较强的蛋白质,占髓鞘总蛋白的40%,等电点在10以上,是强碱性蛋白质。研究表明MBP可***体内Th+细胞,使之穿过血脑屏障,攻击自身神经髓鞘的MBP,从而导致***白质脱髓鞘,引起EAE模型或MS。近年来多用MBP肽代替MBP免疫动物。PLP是高度疏水的膜蛋白,对PLP不同肽决定簇发生反应的CD4+T细胞能诱导急性、慢性复发型及慢性进展型EAE。在MS患者体内也发现与PLP抗原决定簇发生反应的T细胞。 福建专门做eae模型动物实验外包小鼠是EAE研究中常见的物种,主要是因为它们具有成本低、研究方案成熟和具有繁殖转基因品系的特点。

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通过持续不断地对EAE动物模型的建立方法进行改进和优化,我们可以显著提高模型的稳定性和模拟度。这一过程涉及到对实验条件的精确控制、对动物选择的严格筛选以及对诱导疾病方法的精细调整等多个方面。通过改进实验条件,如优化饲养环境、精确控制饲料成分和光照周期等,我们可以减少外部因素对模型稳定性的影响。同时,对动物的选择也至关重要,我们需要选择遗传背景稳定、健康状况良好的动物进行实验,以确保模型的模拟度。此外,通过改进诱导疾病的方法,如优化诱导剂的剂量和给***式,我们可以更准确地模拟MS的病理过程。这些改进不仅能够提高EAE动物模型的稳定性和模拟度,还能为神经科学研究领域提供更加可靠和有效的实验工具。

EAE模型的发展与年龄密切相关。幼龄动物发病后症状很快达到高峰,随后又迅速恢复,和成年动物相比病程较短,其抗原注射部位及CNS内的炎性细胞浸润程度较轻,并且幼龄动物体重偏小,一般情况差,易出现麻醉意外而死亡。若动物体重(周龄)偏大,则发病延迟,且症状较重,所以选择受试动物以青年期为佳。但若作为抗原提供者,其年龄可适当放宽,一般大于4周即可。MS多为青年女性,EAE的发生也存在性别差异。一般来讲,雌性动物较雄性敏感,表现在雌性动物的发病率高,临床症状相对严重,如Wistar大鼠及SJL/J小鼠,但也有的动物如Lewis大鼠,雄性较雌性敏感。另外实验时间选择在夏季比冬春季节诱导动物模型的敏感性更高。敏感性高的动物,有时症状较严重且死亡率高,应引起注意。EAE具有复杂的神经药理学特征,许多目前已用或即将使用的MS药物得以开发、测试或验证,基于EAE研究。

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通过对EAE动物模型的基因表达分析,科学家们得以进一步深入了解多发性硬化症(MS)的遗传背景。这一分析过程涉及对模型动物体内基因表达水平的定量和定性研究,通过对比正常动物与EAE模型动物的基因表达差异,科学家们能够识别出与MS发病相关的关键基因和基因网络。这些基因可能涉及免疫调节、神经保护或修复等多个方面,它们的异常表达可能与MS的发病风险、疾病进程以及疗愈效果密切相关。因此,对EAE动物模型进行基因表达分析不仅有助于揭示MS的遗传机制,还为开发针对特定基因靶点的疗愈方法提供了新的思路和方向。这一研究领域的进展将有助于我们更深入地认识MS这一复杂疾病,为未来的疗愈和预防策略提供有力支持。自身免疫性脑脊髓(EAE)模型是古老、常用的人类MS实验模型。吉林推荐的eae模型如何构建

胶原纤维酸蛋白(GFAP)也参与EAE模型的诱发。吉林推荐的eae模型如何构建

获取实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠小胶质细胞,并检测其特性。方法取8周龄,雌性C57BL/6小鼠行EAE造模,待至发病高峰期(第15天)时以PBS灌注后取小鼠后脑和脊髓,切碎后加胰酶消化,消化完成后通过100μm滤网滤过,而后采用Percoll密度梯度离心法分离获取单个核细胞,进一步利用CD11b与CD45抗体染色,通过流式细胞仪分选CD11b~+CD45~(high)和CD11b~+CD45~(low)细胞,即分别得到相对活化和静息的小胶质细胞,***对流式分选获取的小胶质细胞行qPCR检测。结果通过形态比较,获得了高纯度的小胶质细胞。FIZZ-1基因行qPCR检测,结果显示在EAE急性期M2型小胶质细胞明显增多,符合文献报道。结论该方法能从EAE小鼠体内分离获取高纯度的小胶质细胞,可用于相关目的基因后续检测。吉林推荐的eae模型如何构建

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