天津荧光染料Cy7
Hoechst33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。用于细胞核染色时,推荐的Hoechst33258工作浓度为0.5-10μg/ml。储存条件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。注意事项:Hoechst33258对人体有害,请注意适当防护。荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。抗荧光淬灭封片液(P0126)可以向碧云天订购。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作注意事项:Hoechst33342对人体有一定刺激性,请注意适当防护。荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。CY7 是一种 CY 染料。CY 为花菁 (Cyanine) 的缩写,是由奇数个甲基单元连接的两个氮原子组成的化合物。天津荧光染料Cy7
常用抗体标记荧光染料的特性及其应用
1、FITC:激发波长488nm,比较大发射波长525nm。1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氟离子激光器的流式细胞仪;2)在流式细胞仪的FL1通道检测;3)可用于荧光显微镜技术4)荧光强度易受PH值影响,PH值降低时其荧光强度减弱。2、AlexaFluor488:激发波长488nm,比较大发射波长519nm。1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氟离子激光器的流式细胞仪:2)在流式细胞仪的FL1通道检测;3)具有超乎寻常的光稳定性,非常适用于荧光显微镜技术;4)在较宽的PH值范围内保持稳定(PH4~10)。5)南京星叶生物科技有限公司SuperFluor系列(效果同AlexaFluor系列)质优价廉,欢迎咨询。3、Cy3:激发波长488nm,比较大发射波长570nm。1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氟离子激光器的流式细胞仪;2)在流式细胞仪的FL2通道检测:3)适用于荧光显微镜技术;4)为小分子染料,非常适合需小分子染料的流式细胞术,荧光强度低于PE。 福建化合物荧光染料D-荧光素是荧光素酶 (Luc) 的天然底物,可催化萤火虫产生典型的黄绿色光。
荧光染料,由于灵敏度高,操作方便,逐渐取代了放射性同位素作为检测标记,其广泛应用于荧光免疫,荧光探针,细胞染色等。包括特异性的DNA染色,用于染色体分析、细胞周期、细胞凋亡等相关研究。另有很多核酸染料在多色染色系统中是非常有用的复染剂,可作为背景对照,标记细胞核使细胞内结构的空间关系一目了然。荧光标记的单克隆抗体技术为流式细胞仪在研究细胞膜和细胞内各种功能性抗原、**基因蛋白等领域扩展了无限的应用空间。荧光探针可以通过蛋白质交联剂共价结合在单克隆抗体上。免疫荧光标记**常用的染料有异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻红蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。核酸荧光染料对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度,就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量,并可以对细胞周期和细胞的增殖状况进行分析。有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。
使用萤火虫荧光素酶(Fluc)作为报告基因和 D-荧光素作为底物的生物发光成像(BLI)是目前应用*****的技术。将总信号强度相对于 D-荧光素注射后的时间进行绘制,以生成时间-强度曲线。除了峰值信号外,还确定注射 D-荧光素后固定时间点(5、10、15 和 20 分钟)的信号作为峰值信号的替代。给定时间-强度曲线中的信号针对曲线中的峰值信号进行归一化,以表示 D-荧光素注射后时间变化的模式[3]。每克体重注射 10 μL D-荧光素(腹膜内或静脉注射)储备液:对于 20 g 小鼠,标准 150 mg/kg 注射通常约为 200 μL。在室温下解冻 D-荧光素(钾盐或钠盐)并溶解在 dPBS(不含钙或镁)中,**终浓度为 15 mg/mL。通过吸取 5-10 mL 无菌水来预湿 0.22 μm 过滤器。羰花青染料用作 Di 来标记细胞、细胞器、脂质体、病毒和脂蛋白。
所需的CY3-NHS酯的量取决于待标记蛋白的量,以及CY3-NHS的比较好摩尔比为10。示例:假设所需的标记蛋白为500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯体积为5.05μL,详细计算过程如下:1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150,000mg/mmol=6.7×10-6mmol2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3-NHS酯)×MW(CY3-NHS酯)/mg/μL(CY3-NHS酯)=6.7×10-5mmol×753.88mg/mmol/0.01mg/μL=5.05μL(CY3-NHS酯)4.运行偶联反应1)将室温新鲜制备的10mg/mLCY3-NHS酯缓慢加入到0.5mL蛋白质样品中于溶液中,轻轻摇动混匀,然后短暂离心,将样品收集于反应管底部。请勿混匀,否则2)将反应管安置避光处,在接下来的间隔轻轻蛋白水解60分钟。10-15分钟,轻轻翻转几次以充分混合5.偶联偶联物以下方案是使用SepHadexG-25柱封闭染料-偶联偶联物的范例。1)根据制造说明准备SepHadexG-25柱。2)将反应混合物(来自“Runconjugationreaction”)加载到SepHadexG-25柱的顶部。3)一旦样品在顶部树脂表面下方运行,立即添加PBS(pH7.2-7.4)。4)向所需样品添加更多PBS(pH7.2-7.4)即可完成柱密封。吲哚菁绿的主要作用之一是在医学影像学中作为造影剂。黑龙江组织荧光染料
Super Fluor 750(效果同Alexa Fluor 750)荧光染料。天津荧光染料Cy7
荧光染料标记蛋白或肽技术是一种常见的蛋白质体外标记技术。除了GFP等荧光蛋白的融合表达外,目标蛋白还可以通过荧光染料标记直接进行下游实验操作,如***跟踪、细胞分选等。
FITC荧光标记的原理是什么?
荧光标记所依赖的化合物称为荧光材料。荧光材料是指具有共轭双键系统化学结构的化合物。当受到紫外线或蓝紫光的照射时,它可以被刺激为刺激状态。当激发状态恢复到基本状态时,它会发出荧光。蛋白质荧光标记技术利用荧光材料的共价结合在目标分子的基团上,利用其荧光特性提供研究对象的信息。 天津荧光染料Cy7
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