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HE染色实验步骤：（1）样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/ml，滴加于盖玻片上(置于6孔板中)，培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS洗涤3次。（2）样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。（3）染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤。（4）分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。（5）染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。（6）吹干或自然晾干细胞爬片后，中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可让您放心的实验外包公司，专业HE染色实验服务平台。浙江推荐的HE染色报告

HE染色常见问题：Q5：细胞核呈棕红色改变答：苏木素染液过度氧化；或苏木素染色后反蓝不足导致。应该立即更换苏木素染色液。或在流动自来水(一般自来水PH7.5-7.8)，或在稀释的氨水溶液，或在0.2%碳酸氢钠中适当浸泡，这些步骤均可一定程度地加强苏木素染色后的反蓝效果。Q6：伊红染色较淡答：伊红的PH改变了(PH可能已大于5)；或反蓝液体未漂洗干净，残留后影响胞浆嗜酸性染色；或者切片太薄并且在随后的脱水步骤停留过久。对策：检查伊红染色液PH，可采用乙酸调至4.6-5.0。根据以上提示，调整实验步骤。甘肃质量好的HE染色价格科研常备实验操作之HE染色。

HE染色石蜡和冰冻切片样本的处理，样品处理：a.对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10分钟;换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟;无水乙醇5分钟;90%乙醇2分;70%乙醇2分钟;蒸馏水2分钟.b.对于冰冻切片：蒸馏水2分钟。c对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。苏木素伊红(HE)染色对于上述处理好的样品：苏木素染色液染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。浸自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。95%乙醇5秒。伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。

HE染色多聚甲醛保存组织的注意事项：多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸，使溶液pH降低，从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中，固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留，因此后续实验结果如果受醛基影响，须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。石蜡组织切片的HE染色。

HE染色伊红溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行)，可改变组织等电点，促进伊红与胞浆蛋白质结合，其本身不参与染色的反应。当苏木素染色效能极高，很短时间就导致核浆共染时，可适当地添加冰醋酸(一般不超过2%)，抑制苏木素染色效能，方便控制染色时间，同时也能提高苏木素染色的清晰度。现在有商用的HE染色液卖，但是质量参差不齐。如果课题组较大，完全可以自己配制，效果也挺好。配制为乙酸浓度5%-7.5%和盐酸浓度为0.5%-1%的苏木素溶液放置一周，即可完全成熟，染色效果好，氧化膜和结晶都很少(一般苏木素中酸度越低越容易产生氧化膜和结晶，这也是提示更换苏木素的标志之一)。HE染色取材、染色以及分析方法介绍。甘肃质量好的HE染色价格

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HE染色法的话，不能准确说出细胞器的颜色，实验记录或考试时只能说染色效果为 :细胞核蓝色，胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。或者详细说明如下:细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ；伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。浙江推荐的HE染色报告