苏州全自动PCR技术在动物疫病检测的应用

巧亦捷（ingeNova）是翊新诊断技术（苏州）有限公司旗下专注于动物体外诊断检测的产品品牌，以翊新诊断全资子公司——苏州翊创生物科技有限公司为主体。巧亦捷系列产品覆盖了猫呼吸道疫病检测、猫消化道疫病检测、犬消化道疫病检测、寄生虫等宠物核酸检测，非洲猪瘟、蓝耳等猪病核酸检测，牛逼支、牛腹泻等牛羊类食品动物的核酸检测，人畜共患病核酸检测，以及鱼虾等水生动物的核酸检测。全自动薄膜微流控核酸检测一体机是巧亦捷系列产品的主打检测平台，巧亦捷基于此平台技术致力于为客户提供快速、精确的动物疫病诊断整体解决方案。翊新诊断技术（苏州）有限公司由微流控技术领域国际**周朋博士创立。公司依托先进的薄膜微流控技术开发一体化、智能化的快速、便捷的POCT体外分子诊断解决方案。针对动物疫病的早期诊断，公司以市场需求为出发点，开发出了低成本、无污染、能够实现真正意义上“全自动，全封闭，样本进，结果出”的薄膜微流控芯片技术和可以用于动物疫病现场快速诊断的分子检测系统，从而为动物疫病的现场诊断提供更加便利的检测手段。目前已开发非洲猪瘟检测、宠物呼吸道多联检测、宠物消化道多联检测等多种试剂及检测方案。常用的qPCR方法有荧光染料法（SYBR Green I）和探针法（TaqMan）。苏州全自动PCR技术在动物疫病检测的应用

在宠物医院，往往没有专业的实验环境与PCR分区，样本中病原体污染、PCR反应后产物污染都是会很影响PCR结果，导致假阳性的出现，其中PCR产物污染是导致化验室环境污染**主要的因素（PCR反应中DNA的复制是指数级的增长）。而选择不善于处理低浓度样本与复杂样本的提取方法，导致核酸提取不完全或者在**1后PCR反应中存在抑制物，污染PCR反应，则会导致漏检，产生假阴性。这些都是在核酸检测过程中需要注意的点。巧亦捷PCR反应系统采用磁珠法核酸提取纯化加荧光探针PCR方法，整机一体化，实现一机提取加扩增，减少人工操作与培训时间，轻松上手。避免污染。苏州微流控PCR动物疫病传染病诊断也类似于刑侦，就是在患者的样本中查找引起症状的元凶——病原微生物。

目前，市面上的宠物用分子检测平台普遍存在操作复杂，单价偏高，灵敏度不佳等问题，巧亦捷依托于自主研发的薄膜微流控技术，经多年沉淀，研发出全自动快速核酸检测一体机及多种配套检测试剂，仪器自动进行核酸提取和PCR扩增，让使用者将样本加入薄膜囊袋中就可上机进行核酸检测，且支持多重联检功能，一次可检测多种病原体。多重宠物检测试剂除了可解决操作的复杂性问题，也由于采用常规的多重PCR策略，可大幅降低检测试剂的费用。

巧亦捷推出的全自动薄膜微流控快速核酸检测一体机采用PCR荧光探针技术、通过大量临床病例验证，准确率高达99%，可以针对犬猫等宠物、畜禽动物、水产养殖动物等常见的传染病进行快速、准确的核酸检测，具有检测速度快、灵敏度高、特异性强的特点，可以在动物患病早期未表现出明显症状时及时进行准确判断，有效杜绝漏检、误诊的风险，帮助兽医师们对动物疾病诊断实现早发现、早诊断、早诊疗、早康复，以减轻它们的痛苦，尽早恢复健康。巧亦捷薄膜微流控全自动核酸检测平台将成为我们保护毛孩健康的重要利器。

市面上现有PCR仪器都有以下几个弊端：1.由于PCR灵敏度极高，实际应用中污染较严重，一旦有少量外源性污染就可出现假阳性结果。2.条件控制不当会造成各种产物突变，从而降低特异性和灵敏度。3.PCR技术需要以已知DNA模板作为扩充模板，必须知道引物的结合部位序列才能合成特异性引物，局限性较大。巧亦捷核酸一体机采用薄膜微流控技术，检测过程为全封闭且自动进行核酸提取及PCR扩增，无需高标准的检测环境，可很大程度上降低污染。结果快速、准确且稳定。巧亦捷全自动核酸一体机无需专业检测人员，仪器上样简便，软件操作易于掌握。苏州全自动PCR技术在动物疫病检测的应用

巧亦捷利用了先进的薄膜微流控技术和qPCR核酸检测技术。苏州全自动PCR技术在动物疫病检测的应用

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（热稳定DNA聚合酶）的作用下，由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应，三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内，以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物，第一步，模板DNA变性，以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物，目的基因作为模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性，使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步，模板DNA与引物退火（复性），模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃，引物与模板DNA单链互补配对。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环，2-4分钟即可完成一个循环，2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍，从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制，因此PCR反应具有高度特异性。苏州全自动PCR技术在动物疫病检测的应用