MII期纺锤体

如何观察纺锤体呢？

在普通光学显微镜下，人类卵母细胞是半透明的，无法对纺锤体的结构进行观察和分析。传统方法是用一种特异的DNA荧光染料对卵母细胞染色，在紫外光下可显示纺锤体，这种免疫荧光方法对卵母细胞有损伤，不能应用于临床。为了更好的观测纺锤体，美国海洋生物学实验室的R．Oldenbourg等利用纺锤体的双折射特性，开发出偏振光显微镜。现今，偏振光显微镜已经发展成为一种无创性的观察和分析纺锤体动态结构的显微观测系统，我们也叫它纺锤体观测仪。它不仅能对双折射性纺锤体信号的有无进行定性分析，还能对信号的强弱进行定量分析。 纺锤体在细胞分裂完成后迅速解体，为细胞进入下一个周期做准备。MII期纺锤体

纺锤体生成

      在含中心体的细胞中，纺锤体的生成开始于细胞分裂前初期 - 即在细胞核膜分解(Nuclear Envelope Breakdown, NEB)之前。初期的结构为两个**的以中心体为核的星状体(asters)。当细胞核膜分解后，染色体和星状体发生一系列复杂的互动反应。**终结果为所有的染色体在纺锤体的**(赤道板,)排列整齐，每两条染色体有一个着丝点，每一个着丝点被一束极性相同的微管（通常称为纺锤丝）附着。此时细胞处于分裂中期，纺锤体生成完毕。实验证明，中心体在这个过程中的作用不是必需的。动物细胞在中心体被激光捣毁后仍旧能够筑构纺锤体，但其位置通常不在细胞的大致几何中心，其后的胞质分裂也会受严重影响。纺锤体 [1]

       在不含中心体的细胞中，纺锤体的生成是由染色体本身主导的。此过程由一小分子量的GTP连接蛋白（Ran GTPase）控制。细胞核分解后，纺锤丝由染色体周围生成。其后这些纺锤丝会在动力分子与为微管动力的合作影响下自动排列为极性相反大致数目相同的两组。每组的极性相对于一组着丝点。同时在微管远端的动力蛋白 dynein 会将这些微管束集中到一点，形成纺锤极区(Spindle Polar Zone)。与此同时，染色体会自动在赤道板排列整齐。纺锤体生成完毕。 上海非侵入式成像纺锤体透明带纺锤体在细胞分裂中的稳定性对于细胞存活至关重要。

纺锤体卵冷冻保存技术一直是研究的热点。纺锤体作为卵母细胞减数分裂过程中的主要结构，其稳定性和形态直接关系到卵母细胞的发育潜力和受精后的胚胎质量。然而，传统的纺锤体观测方法往往需要对卵母细胞进行固定和染色，这不仅破坏了细胞的活性，还可能引入额外的损伤。因此，非侵入式成像技术作为一种新兴的研究手段，在纺锤体卵冷冻研究中展现出了巨大的潜力和优势。非侵入式成像技术是指在不破坏细胞完整性和活性的前提下，通过光学、声学、电磁等物理手段对细胞内部结构进行成像的方法。这类技术避免了传统方法中细胞固定和染色带来的损伤，能够实时、动态地观察细胞内部的变化，为研究者提供了更加真实、准确的细胞信息。在纺锤体卵冷冻研究中，非侵入式成像技术能够直接观测到冷冻和解冻过程中纺锤体的形态和动态变化，为评估冷冻效果和优化冷冻方案提供了有力支持。

在生殖医学领域，卵母细胞的冷冻保存技术一直是研究的热点之一，旨在提高女性生育能力的保存与利用。然而，传统纺锤体观察方法往往需要对卵母细胞进行固定和染色，这不仅破坏了细胞的活性，还限制了对其发育潜能的进一步评估。传统纺锤体观察方法，如免疫荧光染色技术，虽然能够清晰地展示纺锤体的形态，但其缺点在于需要对细胞进行固定和染色处理，这一过程不可避免地会对细胞造成损伤，影响后续的实验结果和临床应用。而Polscope偏振光显微成像系统则通过利用纺锤体微管结构的双折射性，实现了对无需染色纺锤体的直接观察。这一技术创新不仅保留了细胞的活性与完整性，还提高了观察的实时性和动态性，为卵母细胞冷冻研究提供了更为准确和可靠的评估手段。纺锤体微管网络的动态变化揭示了细胞分裂过程中分子层面的奥秘。

纺锤体的完整性决定了染色体分裂的正确性。在有丝分裂前期，中心体被复制形成两个中心体，并逐渐分离，形成两个纺锤体。纺锤体的微管从中心体发出，与染色体上的着丝粒（kinetochore）结合。着丝粒是一组复杂的蛋白质结构，可以与微管的末端结合。当纤维束的微管末端与着丝粒结合时，纤维束开始缩短，将染色体拉向两端，实现染色体的精确分离。这一过程不仅确保了每个新细胞都能获得正确数量的染色体，还保证了遗传信息的稳定传递。纺锤体微管与染色体之间的相互作用是细胞分裂的重点事件。美国无需染色纺锤体加热台

纺锤体微管的动态变化受到细胞周期蛋白的调控。MII期纺锤体

纺锤体功能分解

      在细胞分裂中，其主要作用有两个部分。其一为排列与分裂染色体。纺锤体的完整性决定了染色体分裂的正确性。纺锤体的正常生成是染色体排列的必要条件。纺锤体生成完毕后一般会有5-20分钟的延迟，以供细胞调整着丝点上微管束的极性，以及决定是否所有的着丝点都附着正确。此后细胞进入分裂后期，染色体分裂为两组数目相等的姐妹染色单体。同样，纺锤体的完整性决定这个分裂过程在时间和空间上的准确性。

      纺锤体另一功能为决定胞质分裂的分裂面。染色体分裂的同时，纺锤体中的一部分微管不随染色体分裂到两极，而停弛在纺锤体**， 形成纺锤**体(central spindle)。在纺锤中体的**为两组极性相反的微管交叠的区域，称为纺锤**区(spindle midzone).此**区就是接下来的胞质分裂面。胞质分裂开始于分裂后期的较晚期。胞质分裂一般结束于分裂末期后1-2小时，此期间两个子细胞由中心颗粒体(midbody)连接。 一般认为纺锤体的分解发生在细胞分裂末期。 MII期纺锤体