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配制成6mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实验建立大鼠卵巢早衰模型1.实验仪器及材料:如表1所示。表12.实验方法:①动物信息:sd大鼠,雌性,6-8周,体重180-220g。普通环境饲养,灭菌饲料饲养,自由饮水。②分组及给药剂量:如表2所示。表2③给药途径及频率:腹腔注射;2mg、3mg组连续注射7天;4mg、6mg组***天、第八天注射;对照组连续7天注射生理盐水。④病理检测:末次注射后15天,动物麻醉,采集血液,分离血清,elisa法测定血清中e2、fsh、lh水平变化情况。解剖动物,取卵巢组织称重,对大鼠的卵巢组织形态学进行观察。注射期间每天称重,给药后每周称重两次,每天进行阴道涂片检测动情周期。3.统计方法:采用graphpad进行统计分析。所有计量资料均采用均值±标准差表示采用单因素方差分析各组间均值的差异,p<。4.试验结果:(3mg组注射完成后*存活一只,不进行统计)如表3、表4、图1、图2、图3所示:①***水平:与空白组相比,2mg组、4mg组、6mg组e2水平均降低,但是只有2mg组有明显降低(p<),如图1所示;与空白组相比,2mg组、4mg组、6mg组fsh水平均上升,只有2mg组有明显升高(p<),如图2所示;与空白组相比。很多自发性动物模型在研究人类疾病时具有重要的价值。静安区疾病动物模型建模购买
其可与dna链交叉连接,显示出细胞毒作用。溶解后在体内无需载体转运,即可通过带电的细胞膜。由于细胞内氯离子浓度低(4mmol/l),氯离子为水所取代,电荷呈阳性,具有类似烷化剂双功能基团的作用,可与细胞核内dna的碱基结合,形成三种形式的交联,造成dna损伤,破坏dna复制和转录,高浓度时也抑制rna及蛋白质的合成。顺铂又称顺氯氨铂、氯氨铂、ddp、锡铂,是目前常用的金属铂类络合物,在分子中铂原子对其抗**作用有重要意义。但只有顺式才有意义,反式无效。其可与dna链交叉连接,显示出细胞毒作用。溶解后在体内无需载体转运,即可通过带电的细胞膜。宝山区疾病动物模型建模供应商可以克服人类某些疾病潜伏期长,病程长和发病率低的缺点。
腰椎间盘突出是造成全球大部分地区工作缺失和活动受限的主要疾病,随着日常生活节奏的不断加快,腰椎间盘突出症已经成为临床脊柱外科的常见病和多发病,而且发病人群越来越呈现年轻化及普遍化的趋势。该病主要是由于腰椎长期的受力不均或突然性外伤,导致腰椎纤维环出现变形、破裂,纤维环、髓核及软骨终板单独或同时外突,从而压迫到坐骨神经、神经根或马尾神经,患者出现腰部疼痛,牵连股部,下肢足部放射性疼痛,引起神经功能、运动功能障碍,特定身体部位出现麻痹或瘫痪症状。良好的腰椎间盘突出动物模型的建立,可以生动直观的帮助医疗工作者理解腰椎间盘突出压迫神经后,神经的病理生理变化以及疾病的发***展规律,并可以通过成熟的动物模型,探索有效的***方法。近年来,随着对腰椎间盘突出症的认识研究的不断深化,人们希望通过建立一种可靠、有效的腰椎间盘突出的动物模型,通过施加干预因素,更加准确地观察模型体内产生的变化,探究人体内疾病发生机理,并将研究成果推广到临床,为***腰椎间盘突出症提供合理、有效的防治手段。因此。
实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。大鼠疾病建模请找上海东寰。
具体实施方式下面结合附图和具体实施方式对发明作进一步阐述。本发明构建了pirb基因敲入的小鼠动物模型,将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内。具体来说,构建一个cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,将其克隆进入rosa26基因的内含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七号染色体。本发明pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法,具体按照以下步骤具体实施:步骤1、根据小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher软件在1号内含子设计grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因组数据库基因,采用crispr脱靶效应软件cas-offinder检测潜在的脱靶位点:**终选取两个grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg将grna1和grna2分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构;步骤2、利用c57bl/6小鼠文库bac克隆,通过pcr扩增获得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法构建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的质粒打靶载体,通过酶切、pcr及测序对打靶质粒载体进行验证,图1为构建好的pirb基因打靶载体的示意图。确定研究疾病目的了解影响疾病发生的内在与外在因素。江苏呼吸疾病动物模型建模
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可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的,但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等,可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法,检测方法等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规实验方法,检测方法等。实施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液50ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例3建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液25ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成4mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中。静安区疾病动物模型建模购买
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