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细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液,室温培养30分钟,弃固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5分钟,以中和过量的多聚甲醛;(c)弃甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好?上海东寰告诉您!北京哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒评价
通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留。注:贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。上海哪家公司提供EdU细胞增殖检测试剂盒公司EdU细胞增殖检测试剂盒可以去哪里购买?
免疫荧光技术服务免疫荧光技术服务(DH0014)一、服务介绍免疫荧光技术(Immunofluorescencetechnique)又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展*早的一种。将抗原或抗体用荧光素进行标记,标记的抗原或标记的抗体与相应的抗体或抗原反应后,测定复合物中的荧光素,这种免疫技术称为免疫荧光素技术。免疫荧光细胞化学分直接法、夹心法、间接法和补体法。二、服务内容及价格服务编号服务内容服务价格服务周期(工作日)DH0014-01免疫荧光单标记检测咨询咨询DH0014-02免疫荧光双标记检测咨询咨询三、客户提供1、细胞株或细胞爬片。注:细胞爬片不宜太密;2、荧光检测所用的抗体3、实验前,客户需告知具体的细胞处理方式及详细要求。注:若有特殊处理的样品,请尽可能出示相关材料(具有保密性的材料除外)。四、服务流程免疫荧光单标记方法免疫荧光单标记是指只标记一种蛋白质分子,方法比较简单,只要按照染色步骤去做,通常不存在太多的问题。但要注意固定液的选择,固定液选择的合适与否,可能会直接影响染色结果。具体染色方法如下。1、所需材料与试剂a,培养在盖玻片或玻璃培养皿中融合程度达到60%-70%的细胞。b,一抗、FITC或TRITC标记的二抗。c。
EdU细胞增殖检测试剂盒更准确--无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免变性带来的样品损伤,确保细胞核边缘清晰完整;更简单--无需抗原抗体反应,基于小分子化学反应的检测方法,简单高效,反应单需要几分钟;更灵敏--无需抗体,检测染料单为BrdU抗体的1/500,更容易扩散,即使单个增殖细胞也能准确检测;更快速--无需过夜,省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤,完成整个检测周期单需2.5小时;更兼容--对样品几乎无损伤,更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记,能够同时检测细胞其他性状特征EdU细胞增殖检测试剂盒的功能具体介绍。
EdU与T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更准确地反映DNA复制活性。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性,适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究,尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU细胞增殖检测试剂盒使用时要考虑什么问题?河北口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒
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细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗药物效果等的基本方法。公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成。初使用的通过检测DNA合成来检测细胞增殖的方法是放射性标记核苷掺入法,如氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷([3H]thymidine)掺入法。细胞活性的细胞增殖检测方法,能检测到细胞的总体增殖效果,但无法检测到单个的增殖细胞。这几种方法尽管都不是检测DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine掺入法。上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法北京哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒评价
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