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高压灭菌造成培养基结焦焦化问题:在实验过程中,检测人员发现在高压灭菌后的培养基有结焦焦化现象。微生物认为造成这种现象是:控制培养基在容器中不要超过百分之八十,避免填充过多。注意控制高压灭菌时间过长(115-116度)二十分钟即可,温度不超过121度,而且灭菌后的培养基在高温环境中不要长时间存放。以上原因都会导致培养基结焦焦化。贮存:培养基在30℃下放置1天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。湖北培养基制备仪供应商
培养基的制备原则和要求:培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要,用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择培养基、鉴别培养基和厌氧培养基。在制备培养基时,应掌握如下原则和要求:(一)培养基必须含有细菌生长繁殖所需要的营养物质。所用的化学药品必须纯净,称取的份量务必准确。(二)培养基的酸碱度应符合细菌生长要求。按各种培养基要求准确测定调节pH值。多数细菌生长的适宜pH值为7.2~7.6,呈弱碱性。琼脂培养基 培养基制备仪售后培养基中营养物质的浓度过大,会使渗透压过高,使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。
培养基的类型:1、根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。(1)天然培养基:天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。用作这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源多方面,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基。这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响。(2)合成培养基合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的培养基,它是用已知化学成分的化学药品配制而成。这类培养基化学成分精确、重复性强,但价格昂贵,而微生物又生长缓慢,所以它只适用于做一些科学研究,例如营养、代谢的研究。(3)半合成培养基。
配制培养基需要哪些制备:(1)称出规定数量的琼脂和蔗糖,加水直到培养基较终容积的34,加热溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液体培养基(不加琼脂)时无需加热。(2)按需要加入一定量的各种贮存母液,包括生长调节物质和其他特殊附加物。吸取母液要使用专一的移液管。如有必要,培养基中所需的维生素,可在高压灭菌之后通过减压过滤装置或微孔过滤器灭菌后再加入。(3)蒸馏水定容。充分混合后调节培养基的pH,一般以5.66.0为好。(4)培养基分装,分装量一般以占培养容器的1514为宜。之后在24h内完成高压灭菌,也可以高压灭菌后再进行培养基的无菌分装,室温下存放备用。暂时不用的培养基应放置于10摄氏度下保存,而含有生长调节物质的培养基在45摄氏度保存更佳。组合培养基是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。湖北培养基制备仪供应商
调节氧化还原电位(Eh)各种微生物对培养基的Eh要求不同。湖北培养基制备仪供应商
培养基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方称取各种药品,加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状,加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。3、调PH:用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。4、过滤:滤纸或棉花进行过滤。5、分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。(1)三角瓶:若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,较多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。(2)试管分装:液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度。固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。6、包扎:分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。7、灭菌:按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。湖北培养基制备仪供应商
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