广东实验室培养基制备器

培养基的配置应该注意的几大步骤：常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净，晾干后备用。（1）平皿用纸或布包好，或装在金属盒内，于121℃高压蒸汽菌3min后烘干，备用。（2）试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好，再用布或报纸包扎好，121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干，备用。（3）吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端（防止污染物吸出，或橡皮帽内的气体污染），然后用纸包后或装入金属吸管筒内，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。其他玻璃器皿均应按上法处理，也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后，备用。制备培养基的操作要点：液体培养基所配制的培养基是液态的。广东实验室培养基制备器

培养基制备的基本方法和注意事项：1、培养基各成份的混合和溶化培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。好好使用不锈钢锅加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化，迄至煮沸2、培养基pH的初步调正因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，培养基各成分完全溶解后，应进行PH的初步调正。例如，牛肉浸液约可降低pH0.2，而肠浸液pH却会有明显的升高。因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的好终PH，保证培养基的质量。PH调整后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。3、培养基的过滤澄清液体培养基必须较全澄清，琼脂培养基也应透明无明显沉淀，因此，须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法，滤纸应折叠成折扇或漏斗形，以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。河北琼脂培养基制备器在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分。

利用三角培养瓶制备培养基：包扎，分装好后，塞上棉塞，在用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌，按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。摆斜面，灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成为一个斜面，约占试管长度的1/2。贮存，培养基在30℃下放置，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。培养基是细胞生长的必需营养物质，利用三角培养瓶制备培养基可按照以上步骤操作，在使用前需确保培养基的无菌性，以免影响细胞正常繁殖。

培养基的分类：培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎（现试管一般多有用螺旋盖者）。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基较终pH之用。制备培养基的操作要点：体培养基营养成分分布均匀。

培养基的使用：1.琼脂培养基的融化：将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min），以免玻璃容器发生破裂。融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温，冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用，放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特别是灵敏性培养基，应根据相关标准，缩短融化后放置的时间。培养基制备器完全灭菌后用于单种微生物培养和鉴定，一般都是在无菌状态下储存，定量使用的。广东实验室培养基制备器

液体培养基具有进行通气培养、振荡培养的优点。广东实验室培养基制备器

三角培养瓶是细胞培养中的常用耗材，也可用于培养基的配制、混合及储存。利用三角培养瓶制备培养基可以按照以下步骤操作：配料：配方换算→在容器中加入少量水（蒸馏水，自然水）→按照配方称取各种药品（依次加入）→加足所需水量（一药一勺，取药后立即盖上瓶盖）。溶解：淀粉溶解：少量冷水调成糊状。加热溶解，特别是加有琼脂的培养基，一定要煮沸，琼脂的熔解温度95-97℃，且需要边加热边搅拌以防止烧焦。调PH：用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。过滤：滤纸或棉花进行过滤。分装：一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角培养瓶：若作静置培养，则100ml培养基/250ml的三角培养瓶，很多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶，否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞，造成染菌；若作摇瓶培养，则15-20ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。试管分装：液体培养基一般装4-5ml，约试管的1/4高度；固体斜面培养基一般装3-4ml，约试管的1/5高度。广东实验室培养基制备器