宿迁去外泌体胎牛血清
细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理?一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:细胞生长过老,破碎的细胞残骸;血清质量不好,反复冻融的结果;配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。血清的保存应该注意:需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。宿迁去外泌体胎牛血清
可能你会觉得,你从一些渠道购买的大品牌的血清,价格便宜,细胞养的还挺好。所以也不在乎。因为你的细胞不是你想象的那么难养,有些假血清也确实可以养,但是质量,稳定性确实不一样,批间差异大,甚至同一批的血清都不稳定,直接影响到你的实验结果的可重复性和数据的真实性。之前爆出某品牌在血清大量添加细胞因子和生长因子,细胞疯长,就是一做细胞功能性实验,结果惨不忍睹。目前品牌已经被美国所取缔,但这种情况在国内时有发生。至于其他如进口血清和国产血清1:1的比兑啦,血清和培养基混合啦,花样多的要命。大家小心上当!总之,买血清,要求高的直接找大品牌的公司或是正规代理商,要求不是特别高的,可以找一些小品牌的厂家和代理,千万别买伪的血清,因为价格便宜,质量又好又稳定,还是子的可能性太低了!宿迁去外泌体胎牛血清血清可提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质。
血清是血液凝固后的液体部分,不含血细胞、纤维蛋白及凝集因子等,含有多种对细胞生长必需的营养因子及大分子物质。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量对细胞生长必需的生长因子 [1, 2] 。 胎牛血清也含有一些小分子物质,如氨基酸、糖类、脂类及类物质。胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中;因此,胎牛血清应用很较广。比如,胎牛血清能够用在科研、工业生产、疫苗生产的质量控制及生物技术药物的质量控制领域。相对于新生动物血清或成体动物血清来说,胚胎期动物血清有什么优点?与其它类型血清相比,胚胎期动物血清含有更多的生长因子,及较少的gamma球蛋白含量。血清与血浆的区别:血清是由血液凝固后的上清液制备的;而血浆中含有抗凝剂,所以血浆中含有血液凝固相关的蛋白。
血清的保存应该注意:需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月,由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。胎牛血清提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,待溶解完成,我们观察到的胎牛血清会表现出黄色或红色。并不是越红越好,也不是越黄越好,淡黄色到淡红色才是比较正常的颜色范围。很多培养细胞的宝宝会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题。那么,血清中可能出现的沉淀物是什么?纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1-2mm,可以用肉眼观察到。磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质,它们也是血清中出现沉淀物的常见原因。关于细胞生长,其实很多试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,当然血清生产商也是这样说的。一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌,如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤。宿迁去外泌体胎牛血清
胎牛血清提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。宿迁去外泌体胎牛血清
很好的胎牛血清:微生物,包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制,支原体经过0.1μm过滤,大多也能消除。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底消除,但对血清质量影响不大。病原毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清相对国产血清而言,检出率不高。宿迁去外泌体胎牛血清
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