舟山标准级胎牛血清
如何区别真假胎牛血清:1、血红蛋白,标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。2、pH,国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。3、微生物。包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性的病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能清理。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清理,但对血清质量影响不大。病原性的病毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中基本都控制的很好。使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。舟山标准级胎牛血清
胎牛血清:胎牛血清参与细胞培养,是细胞生长天然的培养基,它为细胞提供生长因子、结合蛋白、脂质、矿物质、黏附和铺展因子等来促进体外细胞培养。透析胎牛血清主要用于可能需要关注小分子浓度的特殊研究。这主要包括四个领域:蛋白质组学、同位素标记、细胞通讯以及报告基因细胞系的筛选,其中有些领域是相互交叉的。以下稍作举例。将13C或15N标记的氨基酸掺入到培养基中培养细胞,来标记细胞内新合成的蛋白质,一般培养5-6代,细胞中的蛋白质将都被同位素标记。然后质谱分析,即可比较经过不同处理的细胞,其内部蛋白质丰度的变化。舟山标准级胎牛血清胎牛血清是血液凝固后的液体部分,不含血细胞、纤维蛋白及凝集因子等。
胎牛血清的作用:胎牛血清提供对维持细胞指数生长的Hormone,胎牛血清基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。胎牛血清提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,胎牛血清能结合或调变它们所结合的物质活力。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。胎牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。胎牛血清提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
用于体外细胞培养的胎牛血清及其制备方法:将已存放血浆的试管置入-20~0℃环境下保存备用;将血浆分离提取胎牛血清,具体步骤如下:取6-12g氯化钠、0.1-0.5g磷酸二氢钾和1.4-2.4g磷酸二氢钾放入容器中,向其中加入300-700mL去离子水,搅拌均匀,使用质量分数为10-20%的盐酸溶液调节pH为7.0-7.3,将上述所收集的血浆倒入容器中,搅拌均匀,温度设定为25-38℃,静置8-20min,得混合液C;22)将上述的混合液C放入离心机中离心分离8-20min,转速设定为3000-10000r/min,取上清液。胎牛血清提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等。
为什么要热灭活胎牛血清?胎牛血清加热可以灭活补体系统。开启的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,开启淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活胎牛血清。为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现少量沉淀?胎牛血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊。丽水去外泌体血清销售公司
胎牛血清是细胞培养中常用的天然培养基。舟山标准级胎牛血清
胎牛血清应该如何保存,可以存放多久?胎牛血清可长期储存于-20℃冰箱中。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,请不要超过一个月。如果一次性无法用完一瓶血清,建议将胎牛血清无菌条件下分装并储存于-20℃,避免反复冻融。如何正确地解冻胎牛血清?采用逐步解冻法,将胎牛血清从-20℃冰箱转入4℃冰箱融解,随后分装。切忌直接将胎牛血清从-20℃冰箱转移至室温解冻,这样很容易因为温度变化太大导致胎牛血清中的蛋白质凝集从而出现沉淀。舟山标准级胎牛血清
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