唾液外泌体提取试剂盒产品标准

外泌体即细胞分泌的直径约40-100nm的微小膜泡，多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。一开始被当做细胞排泄物，但是近几年，研究发现外泌体可谓是小身体大作用。种瘤发生转移后，如何靶向呈递药物一直是种瘤医治中的一个巨大挑战。发表于NanoLett的一项研究中，研究人员利用外泌体制备药物的递送系统（LD-MDS），并取得成功。在这项研究中，研究人员将相关药物锚定在活巨噬细胞膜上，细胞自身相关蛋白酶响应开启并将药物转载进入外泌体，顺利递送至肺转移灶并且转化为纳米囊泡和次级纳米囊泡，促进转移性4T1病细胞的有效内化和细胞死亡。之后，受损的4T1病细胞可以释放次级纳米囊泡和游离药物分子，再破坏邻近的病细胞。研究显示，LD-MDS对体内直径小于100μm的肺转移病灶显示出优异的靶向效率，并显着压制肺转移。应用Tim4的外泌体强结合能力，可用ELISA或FACS高灵敏度定性检测、定量分析外泌体。唾液外泌体提取试剂盒产品标准

目前市面上开发的外泌体提取试剂盒，是根据外泌体表面由类似于细胞膜的脂质双分子层具有一定疏水性这一特性，用试剂捆绑水分子，从而可通过常规离心收集沉淀获取外泌体。这种快速提取外泌体的方法虽简便快捷、样本需求少、对设备要求低，但与差速离心方法类似，其分离得到的沉淀包含其他细胞分泌的囊泡，且血清中含有大量血清蛋白分子，成分复杂，很可能掺杂一些未知的疏水大分子物质。Sabapatha等曾根据来源于胎盘的外泌体表面特异表达这一特性，使用耦合到磁珠的抗抗体，采用磁珠分选方法分离血浆中胎盘来源外泌体。此法可以提取的胎盘外泌体量少，不适用于大规模提取制备，且免疫磁珠价格昂贵，不利于提取技术的普及。血浆外泌体miRNA测序外泌体天然的可以携带遗传到靶细胞中，从而在生物学和致病过程中诱导遗传修饰。

血清和血浆为常规检测样本，具有微创取样的优点，是诊断疾病的理想样本。血液中外泌体能够作为胰腺ai、胃ai、肺ai和阿尔兹海默等疾病的早期诊断和疗效评价提供潜在标志物。血液外泌体来源的疾病标志物主要包括蛋白质和miRNA两类。Melo等发现利用胰腺ai细胞外泌体表面的磷脂酰肌醇聚糖-1(GPC1)能够实现胰腺ai早期诊断，利用该方法对血清中包含GPC1的外泌体进行检测，能够高特异性(100%)、高灵敏度(100%)地区分胰腺ai患者(246例)和正常人(20例)以及慢性胰腺炎患者(37例)。

外泌体特指直径在30-150nm的囊泡，其主要来源于细胞内多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族（CD63,CD81和CD9）、热休克蛋白家族（HSP60,HSP70和HSP90），本示踪病毒使用CD63作为生物标记，通过将CD63与荧光蛋白偶联，带荧光的膜蛋白会在表达至外泌体膜上，便于后续进行、观察内化或其他实验。慢病毒载体的构建原理就是将HIV21基因组中的顺式作用元件(如包装信号、长末端重复序列)和编码反式作用蛋白的序列进行分离。外泌体的异质性决定了外泌体药物递送系统要根据所传递治理物质的类型、目标组织的特点等进行针对性的调整。

外泌体含有的信号分子能反映分泌细胞的生理状态和功能状态,甚至还会包含细胞病态相关的分子信息,从而提供了丰富的潜在的生物标志物分子源。瘤细胞分泌的外泌体通过对大分子物质的转移和传递调节临近或远处瘤生长的微环境,对促瘤生成及瘤增生、转移发挥着不同的调节作用。瘤细胞分泌的外泌体还可以通过诱导耐药和免疫抑制来促进瘤的发展。外泌体能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更长时间,这些特点使得外泌体可应用于瘤的早期诊断和预后判断。靶向瘤的外泌体的标志物可能为瘤疾病的诊断和治理提供新的指标和途径,对高危人群早期诊断和早期治理以降低或减缓瘤病例的发生上发挥着重要的作用。细胞外囊泡（EVs）表示了细胞间通讯的一个重要模式。罗丽芬集团 外泌体

不同类别的外泌体囊泡有三个征：表面具涂层的膜泡、内含纤维的膜泡、电子致密囊泡。唾液外泌体提取试剂盒产品标准

外泌体本身的惰性相当高，但它们与细胞膜融合可将所携带的物质和信号传递到受体细胞并改变其生物学功能，因此，外泌体是纳米药物递送或基因治理的潜在载体。外泌体作为功能性小RNA和蛋白质的天然载体也引起了药物递送领域的极大兴趣，因为它可以利用这些囊泡治理性递送各种核糖核酸分子、肽和合成药物。外泌体作为疾病诊断标志物的潜在应用依赖于基于外泌体的药物递送系统的技术突破，要将其用于临床治理，外泌体的大规模工业化生产还面临很大的挑战。首先，对外泌体的具体合成机制、功能了解并不是非常详细。其次，现在缺乏经济有效的外泌体分离技术。唾液外泌体提取试剂盒产品标准