嘉兴高离心力离心管选择

超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白，在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子，但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是 15ml规格的管子，不知道有没有谁以前做过的，有关于转速，时间给一些建议，另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理？离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失？如果要把管子重复利用，NaoH清洗后，如何在20%的乙醇中保存？是将其浸到乙醇中防于4度，还是在管子中灌入乙醇？我用过5ml的管子，当时使用的转速是4000rpm 8min，可以把5ml的样品液浓缩到约200ul，这只供参考，具体情况还要由您的样品决定。我保存5ml管子的方法是把内管取出，浸泡于装有20％乙醇的烧杯中。四度保存。超滤离心管是一种用于分离和浓缩生物样品的实验室设备。嘉兴高离心力离心管选择

超滤离心管关于回收率的疑问？一般对浓度大于0.1mg/ml的溶质进行回收，回收率在90%以上。通常，样品损失是由于滤膜表面和料管表面的非特异性吸附造成的。为了获得较高的回收率，所选滤膜的截留率约为目标蛋白的1/3。超滤膜是一种非对称膜，其孔径呈正态分布。在高压离心下也可能发生泄漏，在这种情况下蛋白质可能会发生变形。因此，截留孔径越小，流速越慢，但回收率会更高。浓缩过程中有蛋白质沉淀，如何处理？如果蛋白质浓缩过快或过多，都可能造成蛋白质沉淀，浓缩后的蛋白质之后浓度不宜过高；对于对浓缩速度敏感、易沉淀的蛋白质，建议改进方法如下：1）降低离心速度，2）使用截留分子量较大的超滤膜3) 吹吸浓缩管，然后离心。嘉兴高离心力离心管选择超滤离心管利用超滤膜的过滤作用将目标物质从混合物中分离出来。

选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速rpm换算成g之后，有所不同。

使用后用0.1M NaOH泡24h，然后20%乙醇浸泡保存。这个我是听老板们说的，的确乙醇泡完后孔径会增大，基本就是5-10KD较大，也就是说如果你的蛋白在21KD以上，应该没问题。或者可以不用乙醇泡，用NaOH洗之后直接用无菌水保存，每周换一下液体，应该没有问题。看看说明书不就结了！我原来在CRO的时候一直是重复用的，也没见什么不好啊！短期会用的话，用20%的乙醇泡着，回头拼命用millipore的水充干净，然后在用样品缓冲液平衡一下就好，至于有些人说的改变孔径，也没那么大影响的，你至少跟目的蛋白分子量差别3倍的截留分子量才安全的不是吗?1个月以内不用的话，建议用100mM的NaOH保存！更长时间的话加0.02%的叠氮钠，但那个东西强致疾病物，不建议使用。理论上截留目标物，孔径应选1/3~1/5的膜；透过目标物，孔径应选5-10倍的膜。超滤离心管可以用于制备疫苗、抗体等生物制品，以缓解某些疾病。

以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用设备头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml。离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。超滤离心管的优点包括速度快、效率高、易于操作和清洗等。嘉兴高离心力离心管选择

超滤离心管可以用于检测样品中的蛋白质、碳水化合物等有机分子。嘉兴高离心力离心管选择

超滤离心管应用：1、组成部分：该装置包括一个盖子、一个过滤器和一个50ML的离心管。2、带有摆桶式或定角式转子的离心器以及可以容纳50mL试管的样本腔/试管座。①注意：为了避免在离心过程中损坏装置，在旋转前请检查间隙。 3、带有200微升(μL)的移液管，用于浓缩液回收适用性。①注意：该产品未经消毒，只供一次使用，保质期3年。为确保对预定用途的适用性，建议进行初步的回收和截留试验。4、浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(单株或双株DNA/RNA样本)、微生物、洗出液和净化样本的生物样本。5、净化组织培养基提取液和细胞溶解液中的大分子成分，从反应混合液中去除引物、连接或分子标记，在HPLC之前去除蛋白质。嘉兴高离心力离心管选择