山东慢病毒构建型糖尿病细胞模型
表达HLA-A2的EndoC-βH5-HLA-A2系是通过每105细胞使用100ngp24衣壳蛋白与pTRIPDU3CMVHLA-A2IRESPURO慢病毒转导EndoC-βH5来产生的。在1mg/ml嘌呤霉素存在下将细胞扩增三周以选择转导的细胞。为了完全成熟,将EndoC-βH5和EndoC-βH5-HLA-A2细胞再培养3周,并用5mM他莫昔芬和0.5mM更昔洛韦处理,以切除永生化基因并选择切除的细胞。使用胰蛋白酶(25300e054)收集所得细胞,表达EndoC-βH5细胞的修饰HLA-A2引发同种异体反应性T淋巴细胞ji huo,概括了1型糖尿病中涉及的一些自身免疫机制。糖尿病细胞模型——即用型 EndoC-BH5 细胞是第三代永生化人类胰腺 B 细胞系。山东慢病毒构建型糖尿病细胞模型
Human Cell Design的细胞模型通过多轮优化和严格的质量控制,确保每一批次的细胞都具备高度的均一性和功能性。这些细胞不仅能够在体外条件下长期稳定生长,还能够在高通量筛选实验中表现出色,为研究人员节省了大量时间和资源。HCD 的产品已成为许多科学家进行糖尿病研究和药物筛选的工具。 Human Cell Design 不断推动技术创新,致力于为糖尿病研究提供先进的细胞模型。其开发的 EndoC-BH5 细胞系不仅具有优异的胰岛素分泌功能,还能够模拟胰岛细胞的代谢反应,为研究糖尿病的病理机制提供了重要的实验平台。通过与全球的科研机构合作,HCD 不断优化其产品和服务,满足科学家们不断变化的研究需求。II型糖尿病糖尿病细胞模型糖尿病研究策略胰岛B细胞冻存复苏步骤。
EndoC-βH5GLTx、EndoC-βH5HLA-A2、EndoC-βH5等细胞可在体外在葡萄糖剂量刺激下产生正常的胰岛素分泌反应,对GLP-1R/GLP-1等胰岛素刺激因子产生正常响应,可以响应细胞因子刺激,表达HLA-A2等T细胞受体,因此可用于糖尿病炎症相关等多种药物开发实验。EndoC-BH5细胞可批量稳定生产,因此可以进行基于siRNA的高通量筛选研究中,用于鉴定出潜在的2型糖尿病药物靶点。Human cell design 构建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰岛B细胞模型。通过多轮次优化改良,获得的功能胰腺B细胞,无限接近天然人源胰岛B细胞,其胰岛素分泌功能与天然细胞类似,基于PDX1/NKX6.1关键基因验证的细胞均一性达到90%以上(左图),在2.8 mM and 11 mM葡萄糖剂量下表现出10倍的胰岛素分泌反应(右图),对GLP-1R激动剂, Exendin4刺激产生明细那反馈, 且可实现批量化生成,实现稳定供应。
根据啮齿动物β细胞获得的数据,葡萄糖转运蛋白SLC2A2被认为是葡萄糖感知的主要决定因素,而后来的研究表明,葡萄糖激酶(GLK)是主要决定因素。在人类β细胞中,GLK被认为是葡萄糖感知的主要决定因素。为了克服这些限制,在HumanCellDesign中生成了新的β细胞系。EndoC-βH1是通过将表达SV40LT的慢病毒载体转导到人类胎儿胰腺芽中来开发的。随后将转导的芽移植到SCID小鼠体内,生成的表达SV40LT的细胞增殖并形成胰岛素瘤。人源胰岛B细胞模型对于与胰岛相关的代谢疾病研究,包括糖尿病,糖尿病炎症, 针对GLP-1R的Exendin4等类似药物开发有重要作用。通过干细胞诱导B细胞产生的胰岛B细胞存在纯度较低,缺乏成熟胰岛B细胞功能等问题。通过捐赠组织的胰腺B细胞提取,存在供应量较低,明显批次效应,耗时较长等问题。使用糖尿病动物模型进行研究会比糖尿病细胞模型成本更高昂,周期更长。Human cell design为客户提供多种胰岛B细胞类型的操作手册。
Humancelldesign(HCD)通过将永生化转基因hTERT和SV40大T以及单纯疱疹病毒-1胸苷激酶整合基因转移至人胎儿胰腺中,产生EndoC-βH5细胞。扩增后使用CRE ji huo去除永生化转基因,并使用更昔洛韦消除剩余的未切除细胞,所得细胞作为可立即使用的EndoC-βH5细胞进行分发。EndoC-βH5已经成功进行了转录组、免疫学和的功能测定。即用型EndoC-βH5细胞显示出高效的葡萄糖依赖性胰岛素分泌。欧洲四个du li实验室观察并再现了强劲的10倍胰岛素分泌指数。EndoC-βH5细胞响应葡萄糖以动态方式分泌胰岛素。GLP1R和GIPR介导的信号增强葡萄糖刺激EndoC-βH5细胞的胰岛素分泌。糖尿病细胞模型EndoC-BH1细胞检测到B细胞转录因子PDX1, MAFA, NKX6-1和NEUROD1表达与人胰岛细胞制备相似。浙江糖尿病细胞模型
Huamn cell design(HCD)提供的糖尿病细胞模型经过了法国生物医学局批准。山东慢病毒构建型糖尿病细胞模型
Human Cell Design 以其技术和创新能力,在人源细胞模型领域树立了榜样。其开发的人源胰岛β细胞模型不仅为糖尿病研究提供了强有力的支持,还为药物开发和细胞治疗带来了新的希望。随着技术的不断进步和应用的不断扩展,HCD 将继续致力于推动人源细胞模型的前沿研究,为人类健康事业做出更大的贡献。HumanCellDesign的EndoC-BH5细胞系通过先进的基因编辑技术,成功模拟了天然胰岛细胞的功能和结构。这些细胞不仅能够在高葡萄糖环境下表现出明显的胰岛素分泌反应,还能够响应不同的胰岛素刺激剂,模拟人体胰岛细胞的生理状态。这些细胞模型为科学家们提供了宝贵的研究资源,推动了糖尿病研究的进展。山东慢病毒构建型糖尿病细胞模型
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