杭州微滴式数字PCR原理

MicroDrop-100微滴式数字PCR应用范围如下：a.动植物检验检疫，动物源性分析、极微量病原菌检测定量分析、转基因产品检测；b.降低筛查成本、缩短检测周期，适用于T13\T18\T21三体综合征等遗传病的风险评估；适用于zhong瘤早期筛查、分子分型、靶向用药和疗效监测等；适用于传染性疾病的早期诊断和诊疗指导；c.可用于DNA甲基化的检测、CRISPR-Cas9基因编辑效率检测等。d.基因表达差异监测单细胞研究：测序、PCRe.无创产前筛查：低成本、快速、传染性疾病：HBV、HIV、CO VID-19定量流式检测，顺序逐一检测每个微滴，无荧光交叉干扰，微滴阴性阳性判读准确。杭州微滴式数字PCR原理

数字PCR为juedui定量，qPCR为相对定量，数字PCR较qPCR更精细、更灵敏。所以说，未来数字PCR将成为qPCR的重要补充，在部分领域逐步替代荧光定量PCR。未 来这些领域将广泛应用到数字PCR：科研：高校（生命科学学院、环境学院、医学院、药学院）等。医院：病理科、血液科、妇产科、心血管科、检验科、转化医学中心：研究院单位、疾控中心、海关（出入境检验检疫）、质监局、环境/环保局等。企业：第三方检测机构、IVD(分子体外诊断试剂)、生物制药等。南通微滴式数字PCR代理商理论上可覆盖qPCR（荧光定量PCR)的所有应用。

目前数字PCR技术在临床领域已经有着非常***且***地应用，例如在病原微生物检测中的应用：HBV检测、HIV检测、甲型流感病毒检测等；在产前诊断中的应用：13/18/21号染色体三倍体检测、遗传性耳聋检测、地中海贫血检测及优生五项的病毒检测等；在**靶向***相关基因检 测中的应用：肺*EGFR基因突变、ALK基因融合检测、结直肠*KRAS、BRAF基因突变检测、乳腺*HER2基因扩增检测、神经胶质瘤IDH基因突变检测等。以**靶向***相关基因检测为例，在**形成的超早期,会出现**细胞的坏死和凋亡,这些凋亡或坏死的**细胞会释放其DNA进入外周血,因此通过分析循环血液中是否含有**特异的游离DNA就可以达到**早期筛查的目的。然而此时DNA含量极低,对检测的灵敏度和精确性要求极高，目前只有数字PCR技术可以检测出来。另外进行个体化***时,需要对基因组样本进行分析,此时利用数字PCR技术也能**提高结果的可信性,进而建立合理***方案。

无创产前检查镰状细胞贫血（sicklecellanemia）是HBB基因突变引起的常染色体显性遗传病，有严重的危害，可以导致高达5%的胎儿死亡率及4.62%的孕妇死亡率 。而精细有效的无创产前诊断是预防镰状细胞贫血患儿出生的有效方法。研究人员采用dPCR技术检测孕妇胎儿游离DNA（cff-DNA）HBB基因突变。结果显示，dPCR技术能够确定87%的男性胎儿（n=45）和75%的女性胎儿（n=20）HBB基因的突变状态。当cff-DNA浓度大于7%时，可以**的检测出HBB基因突变[3]，可以说是相当厉害了。关于甲基化含量的鉴定。

MicroDrop-100数字PCR系统具有如下优点：1、JUE对定量，结果判读不需要依赖标准曲线；2、突破局限，检测灵敏度可低至万分之一；3、专利设计的具有高精度复杂三维微纳防污染结构的微流控芯片，单张可同时处理1-8个样本；4、一键式自动操作，20uLPCR体系可生成100,000微滴，8个样本单次微滴生成 需2分钟；5、FAM、HEX（VIC）双荧光通道，半导体激光器做为激发光 源相比LED光源，稳定性高，功率稳定不影响检测灵敏度，单色性能优异降低对检测特异性的影响，且方向性好；6、检测器为2个光电倍增管，灵敏度及增益优于MPCC或CCD,普通的硅光子计数器，增益为10^5，光电倍增管增益可以达到10^9；7、 知识产权的软件系统可直接计算拷贝数、拷贝数浓度，CNV值，突变丰度；阈值线可自动或手动完成，每个样本可单独设定阈值线；输出数据图标、直方图、一维图、二维图、浓度图、95%置信度不确定性区间等；软件可自动识别复杂微滴分簇四簇；软件具备数据质控功能，支持阳性微滴数、阴性微滴数、总微滴数统计及这些指标的任意组合；单个样本100,000微滴的反应体系以及高灵敏度的检测系统，配以独特的软件系统，可以实现高达20重的PCR分析；8、单次检测通量96个样本，操作灵活；采用主流可靠的解决方案，由微滴生成仪、微滴检测仪、数据分析软件组成。深圳广州永诺数字PCR现货

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研究方向基因表达差异研究检测时完全不依赖传统的Ct值即可实现真正意义上的***定量，从而提供了比实时荧光定量PCR更精确的基因差异表达研究，尤其对于那些靶基因表达差异微小的情况：microRNA、lncRNAs等的表达分析、等位基因的不平衡表达、单细胞基因表达分析、Exosome内核酸分子定量分析等。拷贝数变异(CNV)研究微滴化的样品处理及检测，这种摆脱Ct值的计算方法而直接获取目标基因的***拷贝数，为拷贝数变异的研究提供了***的检测精度。是其他诸如二代测序、芯片杂交等平台无法达到的，因此采用数字PCR能够有效对NGS、aCGH的实验结果进行验证，并具有成本低、通量高的特点。杭州微滴式数字PCR原理

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