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测定精子密度和精子总数的方法主要包括显微镜计数和全自动分析。1.显微镜计数:这是传统的测定方法,需要收集精液,通常是使用量杯。收集后,应在实验室中尽快进行计数。应在光学显微镜下将精子进行分类,这一步非常重要,因为完整的精子才能被计数。然后,将剩余的精液样本通过自然沉降或离心的方法让精子下沉,通过显微镜观察并计数。这种方法需要一定的经验和技巧,而且受到许多因素的影响,如精子的活动性、浓度、形态等。2.全自动分析:随着科技的发展,现在有全自动的精子分析仪,可以快速准确地测定精子密度和总数。这种方法通过激光技术进行,可以测量大量精子,包括前向运动的精子。这些仪器通常可以提供更精确的结果,并且减少了人为错误。在进行精子计数前,男性应避免长时间禁欲,因为这可能会影响精子的数量和质量。同时,健康的饮食和生活方式也有助于提高精子的数量和质量。男性精液检测主要依赖计算机辅助精子分析仪(computer assistant semen analyses,CASA)。美国山羊精子分析W.H.O 4
CASA系统虽然有诸多优点,但是很多因素都会影响到CASA仪器的使用及准确性。CASA系统进行**分析应注意以下几点:3.1标本的采集与制作(1)采集前禁欲2�7天,禁欲时间过长、过短对**质量都有一定影响。(2)容器要清洁。(3)特殊情况下,*可使用专门为采集**设计的无毒性避孕套,普通的乳胶避孕套因含有损害精子活力的物质不可使用。(4)注意保温(20�37℃),并于30分钟内送检验科。(5)标本置于37℃水浴.精子运动参数具有温度敏感性,因此要求计数池应于分析仪恒温板上预温。(6)密切注意**液化的情况,确保液化时间准确,因**样本随放置时间的延长,精子活动力及活动率有减少的趋势。标本液化后取混匀样本**1滴滴在样品池中间,然后进行分析。(7)检测精子活动力,标本密度应控制在2×106/ml到50×106/ml之间。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的标本,通常会增加碰撞的频率,并可能由此出现错误的结果。在这种情况下,建议用同源精浆稀释标本。上海精子分析WOB全自动精子分析仪严格按照世界卫生组织(WHO)和KRUGER标准,并通过ISO9001认证。
医生为了鉴定男性生育能力,常嘱男方作精液检查,正常精液颜色为灰白色或乳白色。如节欲时间长者,可呈淡黄色,若出现鲜红色. 暗红色,则提示患者有炎症或生殖道损伤。每次排精量为2~6毫升,常受排精次数与频率的影响。新鲜精液呈稠厚胶冻状,1小时之内应液化为稀薄的液体,用一根小玻璃棒插入精液中再提起,所形成的精液丝长度一般不超过2厘米,否则视为异常。精液呈弱碱性,PH值为7.2~7.8。正常精子数应超过2000万/毫升。排精后1小时内活动精 >=50%。世界卫生组织推荐精子活动力分为四级:0级:不活动;1级:精子原地摆动;2级:有中等的前向运动;3级:前向运动活跃,快速直线运动。正常的精子活动力为2~3级的精子>=40%~50%.精子形态:畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能单从精液的一项指标定论,应对精子数量 活力 活动率 液化时间 畸形率等多方面进行综合能力分析。 采集精液前5~7天内必须停止性生活,并且不得有**、梦遗等情况,还应禁烟戒酒,忌服对生精功能有影响的药物等。
人类精子冷冻保存和储存:增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容,更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议:将样本分管分罐分开储存;对使用的材料和留存标本建立定期核验程序;所有储罐都应有液位监控报警系统,以监测温度和液氮液位,传感器应连接警报器,可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明,玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻,可以防止冰晶的形成,并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中,也可以使用封闭系统,不需要无菌的液氮。计算机辅助精子分析根据初估的精子浓度选择合适的检测方法,确保检测过程的准确性和可靠性。
通过结果的生物学意义对结果质量进行评估当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向运动精子百分率上的相关性较低]。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较,其结果为:采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数;变异系数(CV)是29%活动精子比率的CV为24%平均路径速度(VAP)的CV为43∙85%。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术(授精IVF)的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能;同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。计算机辅助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科学名词。上海马精子分析W.H.O 6
该设备还支持多种分析模式,包括精子浓度、活力、形态和DNA损伤等参数的测量,满足用户的多样化需求。美国山羊精子分析W.H.O 4
精液一般检查
(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)颜色和透明度:正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黄色。鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症、结核、和**,黄色脓样精液,见于精囊炎或前列腺炎。(3)粘稠度和液化:正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状,在精液中纤溶酶的作用下30分钟后开始液化。如果粘稠度降低呈米汤样,可能是精子数量减少,见于生殖系统炎症,精液不凝固见于精囊阻塞或损伤;如果精液1小时后不液化,可能是由于炎症破坏纤溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活动力而影响受孕。(4)酸碱度:pH值。正常精液呈弱碱性pH7.2~8.0,以利于中和酸性的阴道分泌物,pH值小于7或大于8都能影响精子的活动和代谢,不利于受孕。 美国山羊精子分析W.H.O 4
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