斑马鱼实验解决方案

利用斑马鱼模型点评皮肤肌肉毒性，【点评原理】斑马鱼皮肤结构与功能与人类是高度类似的，斑马鱼皮肤含有基底层、棘层、颗粒层、透明层和表皮角质细胞层；另外还有与人皮肤结构相同的固有层、半桥粒、黑色素细胞、血管和皮下脂肪细胞等。斑马鱼皮肤间质结缔组织、胶原及其接近的纤维母细胞及皮肤基因表达亦与人类皮肤类似。我们点评斑马鱼皮肤肌肉毒性是有4个目标：1.皮肤影响；2.肌肉纹路；3.皮肤凋亡细胞定量；4.皮肤色素的变化。和其它动物模型相比较斑马鱼优势。斑马鱼实验解决方案

报告基因选用GFP或RFP，**小启动子来自斑马鱼gata2基因；将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中，受精卵长大后成为founder；Founder外交（out-cross）得到F1代胚胎，从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎，拍照记录后分类培养；F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP（或RFP）表达图式的Tol2插入位点，并通过与已知基因组数据比较，对插入位点进行定位与分析；通过外交纯化得到转基因鱼，直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。斑马鱼模式生物实验物质对淡水鱼 (斑马鱼) 急性毒性测定方法。

斑马鱼的皮肤结构和功用与人类高度相似，含有基底层、棘层、颗粒层、透明层和表皮角质细胞层。因而，业内普遍认为以斑马鱼胚胎为实验根底的成果，在一般情况下适用于人体，可对化妆品功效声称进行检测点评，例如抗氧化、抗糖基化、抗老、淡斑亮肤等等。根据已备案成功的事例显示，若不包含前期预备的时刻，只是上样检测到出具成果，斑马鱼检测的周期要比其他检测方法周期更短且本钱更低。别的，根据欧盟动物保护法，出生5天以内的斑马鱼胚胎和幼鱼不属于动物，能够替代哺乳动物测验，符合3R（替代、减少、优化）准则。因而，斑马鱼检测在动物福利层面也符合了时代潮流。

斑马鱼敲除品系成功案例1、基因分析分析目的基因的保守结构域；2、靶点筛选设计4个gRNA靶点，PCR检测包含靶点的区域真实序列，显微注射验证靶点效率；3、大规模注射养殖F0Cas9pro+gRNA共注射，共养殖F0约80条用于后期Founder筛选；4、Founder筛选F0代斑马鱼与野生型外交，收集48hpf的F1胚胎抽取基因组，PCR鉴定，测序结果在靶点位置出现双峰的认为产生突变，然后TAclone验证其可能产生的突变方式；5、F1代筛选F1代斑马鱼剪尾筛选，TAclone验证突变方式：斑马鱼试验都需求哪些设备？

斑马鱼是种模式生物，用来做研究的由于斑马鱼基因与人类基因的相zhi似度达到87％，这意味着在其身上做药dao物实验所得到的结果在多数情况下也适用于人体，因此它受到生物学家的重视。因为斑马鱼的胚胎是透明的，所以生物学家很容易观察到药物对其体内***的影响。此外，雌性斑马鱼可产卵200枚，胚胎在24小时内就可发育成形，这使得生物学家可以在同一代鱼身上进行不同的实验，进而研究病理演化过程并找到病因。斑马鱼启发科学家斑马鱼是一种体长3至4厘米的热带鱼，因色彩鲜明的斑纹得名。这种小鱼虽然十分常见，却一直是科学家关注的焦点，因为它具有自我修复破损视网膜的独特能力。英国科学家1日说，他们***发现，人类视网膜中也拥有类似斑马鱼能够修复视网膜的细胞，并计划在5年内将研究结果用于失明患者***，让他们重见光明。这项研究由英国伦敦大学学院眼科学院和伦敦穆尔菲尔兹眼科医院共同发起。研究人员重点研究斑马鱼视网膜内具有干细胞特征的放射状胶质细胞，这种细胞能够分化为各种不同种类的细胞。斑马鱼为何适用于科研？长沙有哪些学校做斑马鱼实验室

斑马鱼在化学品安全性点评与环境毒理学点评范畴的应用也已经十分广。斑马鱼实验解决方案

斑马鱼模型既具有体外实验快速、高效、费用低等优势，又具有哺乳类动物实验预测性强、可比度高等优点，可以有效弥补体外实验和哺乳类动物实验之间的巨大生物学断层，完善现有药物研发体系。将斑马鱼模型鱼体外实验和哺乳动物实验相结合，可以从整体上缩短药物临床前早期研发的实验周期，降低实验成本，提高实验预测的准确性，进而提高药物研发效率，降低药物研发风险。全球医药巨头辉瑞、罗氏、诺华、葛兰素史克、阿斯利康等都逐渐开始使用斑马鱼技术进行药物筛选研发。2009年，斑马鱼药物毒理学评价技术通过FDA和EMA的GLP认证，这标志着斑马鱼模型的安全药理学和毒理学评价结果可以作为正式材料纳入临床试验申报资料。2013年，斑马鱼资料用于CFDA临床申报，目前，中国使用斑马鱼实验数据申报CFDA临床试验批件的新药研发项目已经有4项，2项已经获得批件。美国食品药品监督管理局（FDA）越来越多地应用斑马鱼对临床前药物进行安全性与毒理性评价，并在其官网介绍其研究成果。斑马鱼实验解决方案

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