NWRI琼脂

总体而言，所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源，但由于微生物营养类型复杂，不同微生物对营养物质的需求是不一样的，因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖类、脂类、蛋白质、核酸、维生素等复杂的有机物，因此培养自养型微生物的培养基完全可以（或应该）由简单的无机物组成。例如，培养化能自养型的氧化硫硫杆菌（Thiobacillus thiooxdans）的培养基组成见表3.9。在该培养基配制过程中并未专门加入其他碳源物质，而是依靠空气中和溶于水中的CO2为氧化硫硫杆菌提供碳源。人工合成基因可以在特定的培养基中得到表达，需要选择含有适当营养物质的培养基。NWRI琼脂

培养基的种类有哪些？鉴别培养基：利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同，在培养基中加入特定的作用底物和指示剂，观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂（KIA）、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素（MIU）培养基等。选择培养基：在培养基中加入抑制剂，去抑制标本中的杂菌生长，有助于所选择的细菌种类的生长。例如培养肠道致病菌的SS琼脂，其中的胆盐能抑制革兰阳性菌，枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠埃希菌，因而使致病的沙门菌、志贺菌容易分离到。DRBC培养基培养基应适合不同类型细菌的生长，包括需氧菌和厌氧菌。

动物细胞培养必需的溶液，平衡盐水（BSS）：Hanks 液和Earle液是常用的BSS基础溶液。PH调整液：3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羟乙基哌嗪乙烷磺酸）细胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、胶原酶溶液。1)青、链霉素，每毫升培养液含100U青霉素和100ug链霉素。2)卡那霉素：终浓度为50ug/ml培养液。3）制霉菌素：浓度25U/ml，小瓶分装，每瓶一次用完。常用的动物血清主要有牛血清和马血清。牛血清分为胎牛血清和犊牛血清，前者来源少，价格高；后者要求刚产下尚未哺乳的小牛，因为哺乳后的小牛血清中可能含有更复杂的成分。血清中已知的成分主要有蛋白质、氨基酸、葡萄糖等。蛋白质主要是白蛋白和球蛋白。

细菌培养基之面粉琼脂培养基：面粉60g，琼脂20g，水1000ml把面粉用水调成糊状，加水到500ml，放在文火上煮30分钟。另取500ml水，放入琼脂，加热煮沸到溶解后，把两液调匀，补充水分，调整pH值到7.4，分装，灭菌，备用。微藻培养基，BG-11培养基：NaNO3 1.5g，K2HPO4 ·3H2O0.04g，MgSO4·7H2O0.075g，CaCl2 ·2H2O0.036g Citric Acid （柠檬酸）0.006g，Ferric ammonium citrate（柠檬酸铁铵0.006g，EDTA (dinatrium-salt) 0.001g，Na2CO3 0.02g，A5 + Co solution * （A5溶液1000×）1ml Distilled Water （蒸馏水）919ml。

培养基可以分为有机培养基和无机培养基两类。

合成培养基(synthetic medium) 由已知化学成分的营养物质组成的培养基。根据微生物对营养要求的不同，可完全由无机盐或化合物组成，如：氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、维生素等，其组成成分已知，只要严格操作，各批次间质量可做到稳定一致。此培养基可用来检测某种营养物或药物对微生物代谢的影响。组织细胞培养液均属合成培养基。合成培养基的成本较高，其价格相当于同类天然培养基的几倍以至于几十倍。只含几种无机盐的合成培养基，只适用于自养菌的培养，如培养亚硝化细菌、氧化硫杆菌等的培养基。有些培养基大部分成分为已知化学结构的营养物质，其中的个别或少数成分为未明化学成分的必须营养物，成为半合成培养基，如百日咳菌苗生产用的水解酪素培养基。培养基种类繁多，根据需求选择适合的培养基对于成功的微生物培养至关重要。N6培养基（不含琼脂）

在实际应用过程中，常常需要调整培养基的组成和配方，以优化细胞或微生物的生长和功能表现。NWRI琼脂

鉴别培养基(differential media) 在培养基中加入某一反应底物和指示剂，以区别某些微生物的特性从而鉴别之。又分一般鉴别培养基和选择性鉴别培养基。只用于区别不同微生物种类的培养基称为-般鉴别培养基，此类培养基中一般不加抑菌剂而只含指示剂，如克氏双糖铁培养基，含有葡萄糖及乳糖，以酚红作为指示剂，观察培养基底层与斜面的颜色变化判定细菌对葡萄糖和乳糖的发酵能力，加人柠檬酸铁铵，培养后观察是否产生黑色沉着以判定细菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而产生硫化氢；又如伊红-美蓝琼脂，含有乳糖(反应底物)、伊红-美蓝(指示剂)用以鉴别大肠埃希菌、肠道病原菌和其他杂菌。一般鉴别培养基的特点是在配方中都含有指示剂，并可用于区别不同种类的微生物，有些鉴别培养基也可同时作为细菌的特殊需要用来分离培养某些细菌，如胰酪胨大豆琼脂和巧克力色血琼脂。NWRI琼脂

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