TYCSB液体培养基基础
在培养基中加人某种抑制剂和指示剂,抑制某些细菌生长,促进目的菌的繁殖,并使所生长的细菌菌落具有一定特征,以助鉴别挑选,这类培养基称为选择性鉴别培养基。如SS琼脂,在该培养基配方中含有乳糖(反应底物)、中性红和柠檬酸铁铵(指示剂)、灿烂绿及胆盐等(抑菌剂)。灿烂绿和胆盐等抑菌剂能抑制革兰氏阳性菌及部分大肠埃希菌的生长,而对沙门菌及志贺菌基本无影响,而且大肠埃希菌能发酵乳糖产酸,使菌落变红色,沙门菌和志贺菌不发酵乳糖,其菌落为无色。如细菌产生硫化氢,则与柠檬酸铁铵反应生成硫化亚铁沉淀,菌落中心呈黑色或褐色。以此达到鉴别的目的。干粉培养基的制备需要遵循严格的卫生标准和生物安全操作指南,以确保培养基的纯度和无菌性。TYCSB液体培养基基础
培养基
如何有效避免培养基污染?做好实验操作规则:在实验中制定好统一意识的操作规则至关重要。例如,制定有关实验前和实验中洗手、换鞋、穿戴实验服的规定。还要保证操作的环境卫生、实验材料消毒等等。这样可以降低实验环境中的细菌来源,保证实验材料的纯度,同时也可以提高操作人员的自觉性和流程规范性,然后避免因人为原因而产生的污染。做好培养基制作:在培养基的制作过程中,一些常见的问题往往会导致污染,例如:不干净的试管,不洁净的机器设备,不正确的过滤操作和培养基储存不当等。为了避免这些问题,实验室人员应该采用高标准的实验原料,在制作培养基前彻底清洗操作区,并使用无菌试管及机器设备,千万不要盲目省事不进行适当的实验准备和操作过程。Pachlewski固体培养基某些培养基会在特定环境下产生特定的表型变化,例如MacConkey培养基生成红色菌落表示肠道杆菌的存在。
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有水、氮源、无机盐(包括微量元素)、碳源、生长因子(维生素、氨基酸、碱基、色素和血清等)等。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。
在保存干粉培养基时还需要注意以下注意事项:尽可能缩减干粉培养基长时间不间断存储。因为长时间不使用,尤其是室温下,会受到光照、湿度等自然环境的影响,温湿度波动,会产生不稳定的物理与化学效应,导致化学反应发生,细菌及其他微生物生长。在保存时使用密封包装进行,使其隔绝空气和水分及其他微生物的进入。及时检查干粉培养基的保质期,避免超过保质期的使用,影响实验结果。准确记录干粉培养基的配方,标签上应说明干粉培养基的名称、生产日期、有效期,混合使用指导,以方便日后使用。经过无菌处理的培养基能保证无細菌污染。
制备培养基需要哪些材料?溶菌酶:溶菌酶是一种水解酶,可以分解大多数细菌细胞壁,促进菌落生长。溶菌酶通常与其他元素一起添加到培养基中,以加快菌落的生长速度和密度。营养物质:营养物质是细胞生长和减少细胞死亡所必需的化学元素和化合物。培养基中添加的营养物质包括氨基酸、糖类、维生素、核酸等。这些化合物可以提供细胞所需的能量和原料,促进细胞和菌落的生长。染色剂:染色剂是一类化学试剂,多用于细胞和菌落的研究中。常见的染色剂包括甲基红、溴菲尔蓝、乙酸洋红等。这些染色剂可以用于观察细胞生长和分化、菌落密度、代谢水平和产物含量等。使用干粉培养基进行细胞或微生物培养时,必须遵循严格的实验操作规程和生物安全标准。甘油甘氨酸琼脂基础
如果细菌的生长受到限制,可以尝试调整培养基的成分或添加辅助物质,例如控制培养基中氧气的含量。TYCSB液体培养基基础
半固体培养基(half-solid medium) 在液体培养基中加人0.2%~0.5%的琼脂粉,加热溶解后冷却即成,以倒置不流动的较软状态为宜,一般供细菌动力试验、菌种传代、保存和储运标本之用。固体培养基(solid medium) 培养基中含有足量的凝固剂(琼脂粉>0.5%),在常温下能保持固体状态。此类培养基大都用于微生物的分离、纯化、药敏试验及菌苗制造。如营养琼脂、营养斜面、SS琼脂、TCBS琼脂等。此外,还有一些特殊用途的培养基,如用血清或鸡蛋做凝固剂配成的吕氏血清斜面培养基、鸡蛋斜面培养基等。TYCSB液体培养基基础
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