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在细胞培养过程中，经常少不了HEPES缓冲液。那么，HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31，化学名：4-羟乙基哌嗪乙磺酸，分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2，用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。关于HEPES缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES+NaOH，另一种是HEPES+盐。艾伟拓稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐！江西cas号7365-45-9HEPES现货供应

生物缓冲剂HEPES粉末事实证明，HEPES优于碳酸盐缓冲液等其他缓冲液，可以避免二氧化碳释放导致细胞微细化生长，因此在细胞培养中频繁使用。HEPES的PH值随温度下降而下降，但磷酸盐与碳酸氢盐缓冲液的解离常数pK几乎不随温度变化。HEPES的行为与水相似，温度降低解离常数降低，HEPES可用于维持酶在低温下的结构和功能。HEPES为白色结晶粉末，纯度高、质量好，主要含量在99.50%以上，铁离子在5ppm以下，硫酸盐在0.05%以下，重金属残留量在10ppm以下。提供少量试用样品粉末，可自行配置于溶液中检测使用。山东大批量HEPES批量GMP条件下生产注射级HEPES！

缓冲溶液的作用原理是通过互为酸碱缓冲对之间的酸碱平衡移动来抵御外加少量酸、碱以及稀释作用的。缓冲溶液自身pH值可根据公式进行计算，缓冲溶液的缓冲能力可以用缓冲容量进行标度。但是，任何缓冲溶液的缓冲能力都是有限的，因为当大量的H+或OH-进入溶液时，缓冲溶液中的缓冲对将被大量消耗，抗碱、抗酸的作用也随之减弱直到消失。实际应用中各缓冲对组成的缓冲溶液都有比较好的缓冲范围。在实际生产过程中，如果选择的缓冲溶液缓冲范围与预期偏差较大，使用大量强酸/强碱或许可以强行将溶液pH调至预期值，但此时溶液体系的缓冲容量已消耗殆尽，无法起到应有的缓冲保护效果，对制剂产品后续的加工及长期储存稳定性造成影响。

外源基因导入真核细胞的方法有很多种，如磷酸钙转染法、DEAE-葡聚糖转染法、脂质体法、电穿孔法、显微注射法等。2×HEPES缓冲盐溶液主要用于磷酸钙转染，其主要成分为HEPES，HEPES是一种非离子两性缓冲剂，能有效控制pH在范围，尤其在pH具有较好的缓冲能力，终浓度一般为mmol/L，培养液内含mmol/LHEPES 即可达到较好的缓冲能力。Leagene HEPES缓冲盐溶液(2×HeBS)是一种常用的细胞转染溶液，主要由HEPES、氯化钠、磷酸盐等组成，其**适pH值为，经过滤除菌处理。影响磷酸钙转染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在细胞上停留的时间、休克时间。Leagene 2xHeBS要求DNA浓度在为宜，Hela、BALB等细胞沉淀放置，CHO、DUKX、BⅡ等细胞可以通过甘油、DMSO进行热休克处理以提高转染效率。AVT注射用HEPES已登记。

HEPES缓冲溶液具有对细胞无毒性、不易穿过生物膜、不参与细胞内生化过程等特点，所以在生化实验中具有***的应用，如可用于开放式细胞生长、细胞的长期观察、RNA或DNA提取试剂盒中。其次，相关研究表明以HEPES溶液做缓冲液有利于多肽在金纳米粒子表面的偶联反应。另外，HEPES缓冲溶液对镁生物降解影响的相关实验表明，HEPES能提高镁的生物降解性以及抑制镁不溶盐层的形成。具体应用方面，如盐酸伊立替康脂质体注射液（Onivyde）。艾伟拓GMP条件下生产AVT注射级HEPES。山东现货HEPES批量

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