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为了排除肝素对于细胞增长的抑制作用可能与防腐剂（这里采用苄醇作为防腐剂添加到UFH或LMWH中）有关。我们对不添加防腐剂的肝素进行了相同实验，结果对AT-MSC和BM-MSC细胞增殖抑制趋势相同。在随后的传代培养到3代中的累积的群体中，两种肝素UFH和LMWH对MSC增殖的影响也变得明显，血小板裂解液中肝素浓度较低时累积细胞群体倍增指数(cPD) 较高。CFU-F的塑料粘附生长性能是MSCs培养的先决条件，在96孔板中通过有限稀释的方法结合泊松统计进行CFU-F试验，显示集落形成率CFU-F在高浓度UFH时中度降低，而在高浓度Enoxaparin（LMWH）时明显降低。这些结果表明高浓度的LMWH减少了CFU-F的形成，这与已报道的其他研究结论一致。

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血小板裂解液主要成分为人血小板裂解液,含有较高浓度的生长因子等细胞培养必须物质,在体外细胞培养中可代替胎牛血清和自体血清。人源血小板裂解液就是直接将人类来源血小板细胞经过连续的反复冻融裂解后，进一步提纯这些血小板脱颗粒的商品。血小板裂解液（platelet lysate，PL）是自体或异体血小板富集物经细胞裂解后的产物，已经被诸多研究推荐作为胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）的替代品，应用于间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）的大规模扩增培养。血小板裂解液怎么使用GMP等级的血小板裂解液不含动物源成分的。

SextonBiotechnologies的nLivenPR是一种经过验证的、强大的病原体减少工艺，为细胞培养提供一致的、高质量的培养基补充。与nLiven不同的是Sexton公司另外一款T-LivenPR是PR处理的血小板裂解液的封闭袋装系统版本，该产品涉及一系列包括t细胞生长验证试验的放行测试，确保免疫细胞培养过程中的细胞质量。并且有趣的是，尽管T-LivenPR中在被应用于T细胞等免疫细胞相关Zhi Liao时，对于CAR转导细胞的表型也被发现具有明显的优势。更多详情欢迎咨询上海曼博生物

在本次研究中使用美国Sexton品牌的血小板裂解液hPL替代FBS或者人AB血清的Zui终实验结果比较：1）使用hPL作为血清替代物培养T细胞，转导效率、T细胞扩增率并无明显影响。2）使用hPL作为血清替代物培养T细胞，有助于维持T细胞CD4/CD8比例在40/60-60/40的范围内。3）使用hPL作为血清替代物培养T细胞，获得的TN/TCM比例相对较高，TCM也为AB血清培养组的3-5倍，有文献记载TN/TM表型的维持与对于ZhongLiu长期杀伤能力的改善有一定相关性（Jclininvest.2008:Hinrichsetal.，ProcNatlacademySciUSA2009)。此外，值得期待的是：当T细胞在hPL中培养时，某些转基因表达更稳定意味着实现类似功能效果所需的慢病毒数量的减少。因此美国Sexton品牌的血小板裂解液hPL替代FBS或者人AB血清是CAR-T细胞zhi liao的中T细胞体外培养的理想培养基补充剂选择，目前全球有数百个使用该品牌hPL产品的项目在临床阶段，并且有相关文献分享！产品更多信息请根据下方信息联系曼博生物！GMP等级的血小板裂解液不含动物源成分。

间充质间质细胞(MSCs)体外扩增的培养基一般添加胎牛血清FBS，但是考虑到异种ganran及免疫反应的风险，监管机构并不鼓励使用。人血小板裂解液除了不存在异种免疫反应或牛病原体ganran的风险，有助于增强间充质干细胞的扩增，也相对容易地根据良好的生产规范程序生产，并已用于临床应用，因此现如很多资料显示血小板裂解液已被证明是扩增MSCs一种非常有效的FBS替代方法（参考文献1）。血小板裂解液由血浆组成，含有纤维蛋白原和凝血因子，对于一般细胞培养中涉及的含钙培养基来说通常需要加入抗凝剂（常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等）来防止凝胶形成，其中肝素很为常用。 人源血小板裂解液应用在多种来源的间充质原代干细胞培养过程。性能好血小板裂解液过滤

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血小板裂解液解冻后请立即进行培养基的配制，配置好的培养基在2-8°C环境下保存并尽快使用，建议不超过21天。如解冻后的原瓶无法全部使用，建议按需分装成合适的小瓶中进行-20°C保存一旦产品瓶或袋经过初始解冻过程，建议尽快将产品置于基础培养基中。尽管对于储存在2-8°C的准备好的含有hPL的培养基，Sexton的内部测试有效期为21天，但建议客户进行内部验证研究，以确定其基于血小板裂解液的完整培养基的有效期，使用的基础培养基和添加剂等变量可能会缩短或延长完整培养基产品的有效期。 人血小板裂解液代理商

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