武汉细胞培养用胎牛血清品牌
胎牛血清:在细胞培养过程,质量粗糙的FBS可能会导致细胞出现生长速度缓慢、不贴壁、容易老化等现象,从而导致实验受阻。经过质量验证的FBS,则可以十分确定这款FBS对哪些细胞具有良好的培养效果,进而判断其能否把自己的细胞养好。对于质量好的FBS,通常采用血清敏感性细胞(如干细胞)来进行培养验证,若培养效果良好,则其他常规细胞系的培养就更不在话下。FBS作为其他行业的副产品,其生产在本质上会受到天气、食物供应、经济条件和牛群规模等各种因素的影响,导致血清的供应可能出现货源、价格及批次间的不稳定性,从而造成实验的不顺甚至实验失败。在过去,国内外已有多个实验室出现过因血清批间差异大而导致实验结果无法重复的情况,浪费了巨大的时间和金钱成本。胎牛血清含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养。武汉细胞培养用胎牛血清品牌
胎牛血清制备:离心,将准备好的瓶放入离心套筒调好平衡后,对称放入离心机,按1800转/分钟离心50分钟后,放入4℃冷库备用。抽血清,取出4℃冷库离心好的瓶,注意轻抬轻放,以免将下层血块和血清混层。将经过高压灭菌装有两孔瓶塞的5000ml大瓶的抽气孔一端的管子接好空气滤器,再接到压缩机抽气口上。打开压缩机,用抽血清孔的管子轻轻抽取采的血瓶内的上清液,注意控制好抽管,避免抽到下层血块。将抽好的血清分装,即为粗制胎牛血清,放入-20℃冷库冷藏备用。南京细胞培养用血清哪里有胎牛血清保存条件是在-20°C冻存。
挑选胎牛血清:Antibiotic含量,Antibiotic的使用情况,也需考虑在内。国内外的血清,都不对Antibiotic进行测试(无四环素胎牛血清之外)。但相较于国内Antibiotic的滥用,在其他国家,Antibiotic使用大多较为严格,用量有限,同时每头牛的产品包括血清都可以追溯源头,所以国外胎牛血清不含Antibiotic或者含量极低。内的毒性含量,在挑选血清时,还应关注内的毒性含量的高低。内的毒性含量高,容易引起细胞衰老、凋亡等情况,好的血清,内的毒性应该是极低的。因此,内的毒性可作为血清等级评判标准之一,其含量的高低,在一定程度上,体现了血清品质的优劣。
如果胎牛血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,应该如何去除?胎牛血清中的沉淀物出现有很多种原因,但较普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白在胎牛血清解冻后,也会存在于胎牛血清中,这也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮状沉淀物,并不影响胎牛血清本身的质量。如果想要去除这些絮状沉淀物,可以采取离心法,400g,离心1~2分钟,将上清重新分装即可使用。胎牛血清中含有丰富的促进细胞生长的成分,如维生素、运输蛋白、微量元素、生长因子等。如果一次性无法用完一瓶血清,建议将胎牛血清无菌条件下分装并储存于-20℃。
胎牛血清融化方法:只要2.5个小时,温和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化过程中可以间断轻轻摇摆瓶子,让蛋白在瓶中混匀。此方法不但节约了时间,而且较大限度减少了血清沉淀出现的几率。血清融化过程中,蛋白质会比水先融化。冰块底部亮亮的细丝就是融化中的蛋白,血清在培养细胞中,比较重要的是利用它的活性的因子,因此,融化过程中较大限度地保留因子的活性,就变得非常重要。回忆一下,细胞复苏时,要保持细胞的活性,我们是要遵循“快融”原则还是“慢融”原则呢?快融!血清同样如此!三步法需要两个半小时,4℃过夜需要大约10个小时(冰箱一般设2-8℃,所以各实验室融化时间会稍有出入)。胎牛血清保存避免反复冻融。东莞优级血清供应商
因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较少。武汉细胞培养用胎牛血清品牌
如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?未拆封的血清,一般情况下应存放于-10℃至-20℃,在产品规定的效期内均可使用,若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至合适大小的无菌离心管内,再放回冷冻。将血清从冷冻冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融,或通过水浴锅促使其溶解。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。完全溶解后建议尽快使用,若长时间储存在2-8℃,血清中的各种(脂)蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可见的混浊。武汉细胞培养用胎牛血清品牌
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