RNA全基因组病毒测序服务公司

时间:2023年10月08日 来源:

人类的病毒性传染很普遍,病毒可以通过呼吸道、消化道、皮肤等多种途径进行传播,常常会导致严重的公共健康问题,对人类的健康造成威胁。传统的病毒检测方法主要依赖于细胞培养法、抗原抗体结合法等,这些方法耗时久,灵敏度低,往往不能够满足临床检测需求。随着分子生物学的发展,PCR方法用于病毒检测的案例越来越多,但该方法的特异性限制了其同时检测其它病毒的能力。因此,需要通过新的技术来实现。随着二代测序技术成本的降低与普及,二代测序在临床病原体检测方面的优势也越加突显。该技术基于二代测序平台,可以直接从样本中获得病原体的核酸序列信息,再通过生物信息学的方法对得到的序列进行分析,可以快速地对样本中可能存在的全部病原体进行鉴定,缩短了临床检测的周期。病毒全基因组测序平台,锻炼出—批精通测序的检测队伍。RNA全基因组病毒测序服务公司

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病毒全基因组测序定在探普生物长时间运行过程中,我们接触到的对病毒的全基因组进行测序项目有比较丰富的应用场景。先,从事基因进化/疫苗/药品/抗体研制方向的研究的研究者一定会用到测序。这种场景一般是用密集的sanger测序监测某几个关键基因,搭载一定频率的全基因组测序。这样的组合省时省力省经费,同时能达到研究目的。此外,有的单位需要对传染病的病原进行流行病学监测和研究,如疾控/疫控中心、医院的传染病科室以及一些高校和研究所的相应课题组,可能需要对病毒的全基因组进行测序以后,结合其他上下游的研究数据,达到研究或者监测疫病的目的。


RNA高通量测序价格想要通过高通量测序获得病毒全序列,需要经历:核酸纯化-文库构建-生物信息学分析这三大基本流程。

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第二代测序技术的发展:第二代测序技术(nextgene-rationsequencing,NGS)发展迅猛,与Sanger测序技术相比,NGS是一种能一次对几十万到几百万的DNA分子进行序列测定的高通量的测序技术,这种高通量测序使得对一个物种的转录组和基因组进行细致全貌地分析成为可能,因此又被称为深度测序(deepsequencing).相比传统的个体基因组测序,NGS使得测序价格日益廉价,并且在生物信息学软件的辅助下,可以将大量不同基因片段的信息连接起来进行基因组组装,完成生物的基因组测序,这种新的测序技术革新了植物病毒的诊断方法,对于病毒的流行病学和生态学研究起到了非常重要的推动作用。

目前对我国首例输入性裂谷热病例病毒进行全基因组测定,分析其进化来源及潜在变异.方法提取样本核酸,非特异性反转录扩增病毒基因组RNA,使用IonTorrent二代测序仪进行病毒全基因组测定.对获得的基因组数据进行序列拼接、比对、进化树构建和关键位点分析.结果通过测定获得了病毒全基因组11979nt,该测定病毒属E基因分支,序列与先前南非分离株Kakamas相似度较高(>98%).病毒Gn蛋白C端信号肽区存在1个氨基酸突变.结论本研究分析测定的裂谷热病毒全基因组与目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出现明显变异。


病毒全基因组测序具有的特点:独有的一定定量技术,实现病原定量分析.

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全基因组测序要注意的事项:全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。技术路线:提取基因组DNA,然后随机打断,电泳回收所需长度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接头,进行DNA簇(Cluster)制备,后利用Paired-End(Solexa)或者Mate-Pair(SOLiD)的方法对插入片段进行测序。然后对测得的序列组装成Contig,通过Paired-End的距离可进一步组装成Scaffold,进而可组装成染色体等。组装效果与测序深度与覆盖度、测序质量等有关。常用的组装有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。测序深度(Sequencingdepth)是指测序得到的碱基总量(bp)与基因组大小的比值,它是评价测序量的指标之一。测序深度与基因组覆盖度之间是一个正相关的关系,测序带来的错误率或假阳性结果会随着测序深度的提升而下降。测序的个体,如果采用的是双末端或Mate-Pair方案,当测序深度在50X~100X以上时,基因组覆盖度和测序错误率控制均得以保证,后续序列组装成染色体才能变得更容易与准确。


对病毒全基因组进行测序,是利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因组序列.国内病毒二代测序突变分析检测

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高通量测序技术具有的作用:高通量测序技术在冠状病毒的鉴定中发挥了重要作用,先通过该技术确认了该病原为以前未知的β冠状病毒,其次确认了该病毒与蝙蝠相关冠状病毒ZC45和ZXC21密切相关,同源性约为88%,后高通量测序为后续的诊断提供了强有力的技术支撑。高通量测序能否定向检测细菌病毒等微生物?例如某人有皮肤病,提取组织,能否通过高通量测序来检测后列出所有的致病菌。或者当怀疑的时候,在人体组织中检测是否有某种特定的细菌或者病毒。(不求原理),就是想知道现在的测序技术能否替代传统临床检验方法。相比传统培养等方法,对样本的全微生物检测,或者特定微生物检测,基因测序技术目前的时间消耗,准确率,和金钱成本大概如何。可以定向检测,用特异引物就可以。


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