北京脑梗MCAO模型注意事项
脑梗MCAO模型是一种常用的脑梗动物模型,用于研究脑梗死的发病机制和治*方法。 行为学检测是评估脑梗MCAO模型动物行为变化的一种方法,通过观察动物的行为表现,可以评估脑梗死后对动物认知、运动、情感等方面的影响。 在脑梗MCAO模型的行为学检测中,常用的方法包括: 1. 神经功能缺损评分:通过观察动物的行为表现,对动物的神经功能缺损程度进行评分,以评估脑梗死后对动物神经功能的影响。 2. 转棒实验:将动物放在一个旋转的木棒上,观察动物是否能保持平衡,以评估动物的平衡能力和协调性。 3. 爬梯实验:将动物放在一个有阶梯的平台上,观察动物是否能顺利爬上爬下,以评估动物的肢体运动能力和协调性。 4. 认知功能检测:通过迷宫实验、水迷宫实验等,评估动物的认知功能是否受到影响。通过迷宫实验、水迷宫实验等,评估动物的认知功能是否受到影响。北京脑梗MCAO模型注意事项
检测方法 造模完成后等待大鼠苏醒,依据Zea longa 5分制标准筛选出2分或3分的脑缺血模型进入后续实验。0分:无神经功能缺损症状,活动正常;1分:不能伸展对侧前爪;2分:爬行时出现向左转圈;3分:行走时身体向偏瘫侧倾倒;4分:不能自发行走,意识丧失。行为学指标目前常采用跳台法、避暗法、穿梭箱法来测定动物一次性被动回避反射能力 ; Y 形水迷宫实验、Morris水迷宫实验等测定动物空间分辨学习记忆能力。研究血管性痴呆、脑卒中抑郁症等可以选择旷场试验作为行为学检测指标之一。病理检测常用HE染色观察组织水肿炎症反应等,尼氏染色可以反应神经元细胞情况。北京动物实验脑梗MCAO模型模型检测发现呼吸异常,用镊子将大鼠舌头牵拉至嘴角一侧,防止舌头根部堵塞呼吸道出现窒息情况。
造模方法 颈部备皮常规消毒,取颈正中切口剪开皮肤,分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘; 游离出颈总动脉1.5cm,穿线备用; 向远心端找到颈外侧动脉,游离涌现结扎,提起颈总备用线,在近心端,远心端用动脉夹夹住; 在近心端动脉夹处,用5mL注射器针头刺破血管,稍微提起动脉夹,用镊子夹住线栓,从小口插入动脉后,去掉远心端动脉夹,然后用镊子夹住线栓,线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm; 用备用线将颈总和线栓一起结扎住,*好是结扎双道,记录线栓插入时间,在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住,去掉动脉夹; 注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展,但模型制备的稳定性受很多因素的影响,如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据,对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。
实验研究的前提是选择合适的实验动物模型:大脑缺血再灌注MCAO疾病模型,创造了一个高度复制人类临床脑血管疾病的动物模型,包括了临床病人的疾病特征,这对于临床研究脑缺血的发病机制和药物筛选非常重要。狒狒和食蟹猕猴的颅神经中枢与人类非常相似,但它们价格昂贵且难以饲养。犬大脑的血管床与人类的明显不同,它有一个广*的颈内动脉和颈外动脉的吻合网络。在兔子中,大脑皮层发育不全,无法提供稳定的病理模型。目前,大鼠是*常用的实验研究动物,因为其饲养成本低,繁殖快。因此,大鼠是目前研究心血管疾病*常用的实验动物之一。在大鼠中建立的大脑缺血再灌注实验动物模型是比较好再现的,因为大鼠的繁殖特点与人类相似,CT中脑组织的病理变化与医院中观察到的临床病人非常相似。通过外包实验,可以降低实验室的运营成本,包括设备维护、人员培训等费用。
TTC染色如何测定脑梗MCAO面积-TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。将模型动物大鼠安乐死,解剖取材完整的脑组织,在-20℃速冻20min,便于切片。切片切成6片,每隔2mm切一片。将切片至于2%TTC磷酸缓冲液(PH 7.4)溶液中,用锡箔纸盖住培养皿,放入37℃温箱30min,15min后翻动脑切片,使其均匀接触到染液。物体识别测试:给小鼠展示两个相似的物体,观察其是否能够正确识别并记住这两个物体。南京国内脑梗MCAO模型行为学检测
麻醉时间,麻醉程度适中,过浅影响操作,过深导致死亡。北京脑梗MCAO模型注意事项
在成功建立小鼠脑梗模型后,认知功能的检测可以通过以下方法进行: 1. 迷宫测试:这是一个常用的方法,通过让小鼠在迷宫中寻找食物,观察其寻找食物的速度和正确性,来评估其认知功能。 2. 物体识别测试:给小鼠展示两个相似的物体,观察其是否能够正确识别并记住这两个物体。 3. 社交互动测试:观察小鼠与其他小鼠的互动情况,包括是否能够正确识别其他小鼠,以及是否能够进行正常的社交行为。 这些测试可以帮助评估小鼠的认知功能,从而了解脑梗对其认知功能的影响。北京脑梗MCAO模型注意事项
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