北京浓缩超滤离心管哪家强

时间:2024年05月12日 来源:

超滤离心管应用:除盐、渗滤或更换缓冲液;浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(单株或双株 DNA/RNA 样本)、微生物、洗出液和净化样本的生物样本;净化组织培养基提取液和细胞溶解液中的大分子成分,从反应混合液中去除引物、连接或分子标记,在 HPLC 之前去除蛋白质。产品组成:超滤离心管包括一个盖子、一个过滤器和一个离心管。产品特点:较高的样品回收率 (> 90% 的样品回收率 );垂直膜的设计减少浓缩所用时间(10-15分钟);经过严格的泄漏测试;无 DNase、RNase,无热原、无内元素。使用这个超滤管,厂家强调一定是一次性的,这个超滤管必须只能使用一次,不能重复使用!超滤离心管可根据不同孔径大小选择超滤膜,以便过滤出所需大小范围内的目标分子。北京浓缩超滤离心管哪家强

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选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。北京浓缩超滤离心管哪家强超滤离心管是一个快速、便捷的方法来从混合物中分离和提取大分子,如蛋白质、核酸等。

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超滤离心管通常不需要预处理即可使用,不过对于蛋白质样本处理,特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。虽然PES材料使非特异吸附较小化,但是,某些蛋白,特别是稀的时候,会有问题。非特异结合的程度随着个别蛋白结构的不同而不同。含有带电的或者疏水结构域的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。对超滤离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失,大多数情况下,在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率,因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。钝化的方法是预先用较高容积的钝化溶液预浸泡柱子1小时以上,蒸馏水彻底冲洗柱子,再用蒸馏水离心一次以彻底除去可能残留在膜上的钝化溶液。注意钝化处理后别让膜干了。如果要留待以后使用,需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。

超滤作为一种膜分离技术,普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换,其原理是溶液在力的作用下,通过超滤膜孔径的筛滤,大分子量的颗粒被截留下来,而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜,从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的,这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效,可同时浓缩和纯化分子。如何使用超滤心离心管1. 使用角转子加到超滤装置上,较大样本量为15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 将带盖过滤装置放入离心机转子内; 用一个类似的装置来平衡。3. 使用定角转子时,将薄膜面板朝上定位,较大旋转 5000 xg,旋转 30 分钟。4. 为了回收浓缩的溶质,在过滤装置的底部插入一个移液管,通过左右扫动的方式将样品抽离,以保证总回收率。超滤液可贮存在离心管中。说明:为达到较佳回收率,离心后应立即取出浓缩样品。超滤离心管还可用于检测食品样品中的致病菌、重金属等污染物,并进行食品安全监测和控制。

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离心机的加速度调至较低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。超滤离心管可以有效地去除溶液中的杂质,使样品更纯净。湖州超滤离心管咨询

使用超滤离心管时应注意避免过度旋转或操作不当导致样品失效或污染,并及时更换膜和其他配件。北京浓缩超滤离心管哪家强

使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。这个我是听老板们说的,的确乙醇泡完后孔径会增大,基本就是5-10KD较大,也就是说如果你的蛋白在21KD以上,应该没问题。或者可以不用乙醇泡,用NaOH洗之后直接用无菌水保存,每周换一下液体,应该没有问题。看看说明书不就结了!我原来在CRO的时候一直是重复用的,也没见什么不好啊!短期会用的话,用20%的乙醇泡着,回头拼命用millipore的水充干净,然后在用样品缓冲液平衡一下就好,至于有些人说的改变孔径,也没那么大影响的,你至少跟目的蛋白分子量差别3倍的截留分子量才安全的不是吗?1个月以内不用的话,建议用100mM的NaOH保存!更长时间的话加0.02%的叠氮钠,但那个东西强致疾病物,不建议使用。理论上截留目标物,孔径应选1/3~1/5的膜;透过目标物,孔径应选5-10倍的膜。北京浓缩超滤离心管哪家强

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