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流式细胞仪的光学检测系统:流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染料染色的细胞在激光束的照射下产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测,这种信号基本上反映了细胞体积的大小;荧光信号的接收方向与激光束垂直,经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,形成多个不同波长的荧光信号。光电倍增管接收的信号被积分放大反转换为电子信号输入电子信息接收器,传输给与流式细胞仪相连的计算机。细胞分析仪内设光源、光学透镜、光电转换器、放大器、计算机等重要部件,可逐个统计和分析每种细胞。南京全息无标记3D显微镜供应公司
细胞分析仪性能的技术指标主要有荧光分辨率、荧光灵敏度、分析参数多少及分析、分选速度及纯度等。荧光分辨率是指分辨两个相邻峰的Z小距离,通常用变异系数(CV值)来表示。现在市场上主流型号的荧光分辨率小于2.0%,有的甚至在1%之内。荧光灵敏度反映了仪器探测Z小荧光光强的能力,一般用荧光微球上可测出的荧光(FITC)的Z小分子数来表示。目前细胞分析仪可以达到100以内。一般分析速度为500-10000个细胞/s,分选速度控制在1000个细胞/s以下,分选纯度>98%,有的细胞分析仪分析速度可达100000个细胞/s,分选速度可达70000个细胞/s,分选纯度>98%。兰州细胞外囊泡分离分析系统细胞分析仪在药品筛选、细胞培养、转染等领域中也有普遍应用。
鸡血红细胞标准样品制作过程昭下:取3.8%枸橼酸或肝素抗凝的鸡血(抗凝剂:鸡血=1:4),经PBS清洗3次,再用5~10ml的1.0%戊二醛与清洗后的鸡红细胞混合,室温下振荡醛化24h,Z后经PBS再清洗,贮4℃冰箱中备用。需要指出的是因为未经荧光染色,所测光信号为鸡血红蛋白的自发荧光。流式细胞仪的使用方法:1、打开流式细胞仪的电源,对系统进行预热;2、打开气体阈,调节压力,获得适宜的液流速度;开启光源冷却系统;3、在样品管中加入去离子水,冲洗液流的喷嘴系统;4、利用校准标准样品,调整流式细胞仪,使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上,0°和90°散射的荧光强度强,并要求变异系数为小;
如何从众多的流式细胞仪中挑选出Z适合自己的机型,应当从实际应用出发分析,分析自己的需求,决定什么样的流式细胞仪Z具性价比、Z适合自己。DNA倍体分析,流式细胞仪要求:488nm光源,575nm滤光片。细胞生存能力实验,流式细胞仪要求:360nm光源,455nm滤光片。计数外周血中检测网织红细胞,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm滤光片,液量计数系统。外周血采集物中CD34阳性干细胞计数,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量计数系统。细胞分析仪可检测细胞种群所特有的特定荧光信号,可以频繁地瞬间感知、快速采集所需要的数据。
多个高速计算能力的ADC的应用极大加大了对荧光信号的采样密度,其实际细胞上样速度可以远远超过10万/秒,不会遗漏任何一个细胞信号,并配备真正全自动的分选设置和稳定系统,使分选简单易行并保证准确可靠MoFloXDP专门用的一台高性能服务器来处理和转换接收到的信号,在硬件上为超高速提供了强大的支持独特的分选设计,真正在乎细胞CytoFLEX先进的光学系统确保光信号的损失程度更低,结合24比特信号处理系统,使得其拥有16,777,216道数数据精度及7个数量级的动态显示范围。CytoFLEX更高的数据分辨率,为您的检测带来出色的灵敏度!细胞分析仪作为生物学、医学、药学等科学研究的重要工具,是科研工作者必不可少的仪器设备之一。拉萨全息无标记3D显微镜
细胞分析仪可以直接在已接种细胞的架构中进行样本留取和净化。南京全息无标记3D显微镜供应公司
流式细胞仪的使用方法:1、选定流速、测量细胞数、测量参数等,在同样的工作条件下测量样品和对照样品;同时选择计算机屏上数据的显示方式,从而能直观掌握测量进程;2、样品测量完毕后,使用去离子水冲洗液流系统;3、因为实验数据存入计算机硬盘(有的机器还备有光盘系统,存贮量更大),可关闭气体、测量装置,而单独使用计算机进行数据处理;4、将所需结果打印出来。流式细胞仪的维护保养:样品要制成单细胞悬液,且对被检测样品的保存时间有要求。南京全息无标记3D显微镜供应公司
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