江苏Agilent流式细胞仪设计
荧光信号的接受方向垂直于激光束,经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,使多个不同波长的荧光信号形成。所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度由这些荧光信号的强度来表示。通过电倍增管接收后能够转换为电信号,被计算机识别的数字信号能够由连续的电信号通过A/D转换器转换而成。计算机处理所测量到的各种信号,在计算机屏幕上显示分析结果,也能够打印出来,还能够在硬盘上以数据文件的形式存储,从而为以后的查询或进一步分析做准备。根据不同的测量参数提供了多种检测数据的显示形式。细胞分析仪通过多重荧光染色的组合,能够更为精确地指定不同活细胞。江苏Agilent流式细胞仪设计
死细胞利用PI、7-AAD或EMA进行染色,这些染料不能够对活细胞进行染色。能够同时进行细胞表面标志和活性分析为这个方法的优势。尤其适用于高度坏死的样本。Z常用的是7-AAD,由于在488nm激发下,670nm左右为其Z大发射光,与FITC或PE进行多色标记非常适合。但是随着时间延长,在固定的细胞群体,会重新分配7-AAD,很难区分死活细胞。因此,EMA,对于染色并在固定后12小时以上分析的标本是Z好的选择。EMA与死细胞DNA稳定的共价结合使长时间固定后仍能很好地区分固定前的死活状态得以保证。江苏Agilent流式细胞仪设计细胞分析仪是一种光学显微照相设备,用于对单个成活的细胞进行多参数分析。
流式细胞仪的高速度:分析速度以每秒可分析的细胞数来表示。流式细胞仪是以高速度的数据处理电子系统信号,配合GX的液流控制系统,有力地保证了流式细胞仪的检测功能。流式细胞仪对细胞的检测速度一般为1000~5000个/s;而到目前为止,对细胞的标准分析速度已达到了2×104个/s,Zda分析速度可达到6×104个/s。高灵敏度:灵敏度的高低是衡量流式细胞仪检测微弱荧光信号的重要指标,一般是以能检测到单个微球上Z少标记有异硫氢酸荧光素(FITC)或藻红蛋白(PE)荧光分子数目来表示。以前,每个细胞要带有1000~3000个FITC分子才能在流式细胞仪上测量出来;目前,一个细胞上只要带600个荧光分子,甚至带100个FITC分子,即可以被检测和分选出来。
细胞分析仪性能的技术指标:细胞分析仪性能的技术指标主要有荧光分辨率、荧光灵敏度、分析参数多少及分析、分选速度及纯度等。荧光分辨率是指分辨两个相邻峰的Z小距离,通常用变异系数(CV值)来表示。现在市场上主流型号的荧光分辨率小于2.0%,有的甚至在1%之内。荧光灵敏度反映了仪器探测Z小荧光光强的能力,一般用荧光微球上可测出的荧光(FITC)的Z小分子数来表示。目前细胞分析仪可以达到100以内。一般分析速度为500-10000个细胞/s,分选速度控制在1000个细胞/s以下,分选纯度>98%,有的细胞分析仪分析速度可达100000个细胞/s,分选速度可达70000个细胞/s,分选纯度>98%。细胞分析仪可以进行抗体检测、细胞检测、原核检测等操作以便对已检测的样本进行分析。
流式细胞仪在临床细菌学中的应用有:流式细胞仪泛用于细菌、病原体、血清抗体及药敏试验。在免疫荧光方法中的流式微球捕获芯片技术是流式细胞仪的一个新应用,它将近似于细胞大小的微珠作为捕获载体,使其携带已知荧光抗原或抗体,来捕获检测物中的相关抗体或抗原。由于遮蔽效应可以使荧光微球的发散光减弱,应用不同大小的荧光微球,可同时检测同一标本的多种抗原或抗体。这种方法能同时检测单一液相样本中多个目的蛋白(如同时测定多种细胞因子、多种自身抗体),检测需用标本量少,灵敏度高,重复性好,直接荧光标记易于使用,检测线性范围宽,避免酶联反应所致的人工假象,可用于单细胞分子水平的多参数检验,也可用于寄生虫、病毒或混合传染的检测。细胞分析仪可通过细胞表面荧光标记区分、监测自然杀伤细胞、自然杀伤细胞介导淋巴细胞等。无锡Agilent流式细胞仪生产商家
细胞分析仪可分析细胞数量、活性、增殖、凋亡等多项指标。江苏Agilent流式细胞仪设计
一般来说,在进行较大或者脆弱细胞的分选时,为了得到Z佳结果,应该使用较大的喷嘴和较低的压力;在分选较小或者非脆弱细胞时,如果要增加产量,应该使用较小的喷嘴和较高的压力。细胞分析仪可以对不同的单细胞悬液进行检测,而且在确保细胞数量足够的前提下,可以在短时间内获取大量的细胞,可以同时检测数百万的细胞。细胞分析仪可以对单个细胞的多种特征进行分析,对单个细胞的不同的参数进行分析,借助荧光染色的方式对单细胞受体的表达方式和DNA的含量等进行分析,实现了定量分析和定性分析的结合。江苏Agilent流式细胞仪设计
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