杭州长沙细胞高效转染试剂

时间:2023年10月24日 来源:

具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高,生成可信任的生理学相关数据。2.操作简便、节省时间,只需对X-tremeGENE9DNA转染试剂进行简单稀释,再与质粒DNA共同孵育,即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化工作。X-tremeGENEHPDNA转染试剂简介:X-tremeGENEHPDNA转染试剂是一种高效的无动物源成分的低毒转染试剂,兼容含血清或不含血清的培养基,可用于转染各类真核细胞(包括昆虫细胞)以及多种难转染细胞系。优势:转染试剂的准备①将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。杭州长沙细胞高效转染试剂

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细胞转染的注意事项:物品(PS)物品,比如青霉素和链霉素,是影响转染的培养基添加物。这些物品一般对于真核细胞无毒,但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性,使物品可以进入细胞。这降低了细胞的活性,导致转染效率低。所以,在转染培养基中不能使用物品,甚至在准备转染前进行细胞铺板时也要避免使用物品。这样,在转染前也不必润洗细胞。对于稳定转染,不要在选择性培养基中使用青霉素和链霉素,ICIN选择性物品的竞争性克制剂。另外,为了保证无血清培养基中细胞的健康生长,使用比含血清培养基更少的物品量~广州正规细胞高效转染试剂直销价其它物理和化学介导的转染方法,则各有其特点。

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如何有效提高细胞转染实验效率:1.选择合适的转染试剂不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择较适合实验设计的转染试剂。当然,较适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。2.保持较佳的细胞状态一般低的细胞代数(<50)能确保基因型不变。较适合转染的细胞是经过几次传代后达到指数生长期的细胞,细胞生长旺盛,较容易转染。细胞培养在实验室中保存数月和数年后会经历突变,总染色体重组或基因调控变化等而演化。这会导致和转染相关的细胞行为的变化。也就是说同一种系的细胞株,在各实验室不同培养条件下,其生物学性状发生不同程度的改变,导致其转染特性也发生变化。因此,如果发现转染效率降低,可以试着转染新鲜培养的细胞以恢复较佳结果。

细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染技术已成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越***。那么,罗氏都有哪些转染试剂,其优势都有哪些?图1.细胞转染过程X-tremeGENE9DNA转染试剂简介:X-tremeGENE9DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂,溶于80%乙醇中,经0.2μm滤膜过滤,然后封装于玻璃小瓶中,适用于细胞分析的多种实验。在转染过程中是可以使用血清的。

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细胞转染的常用方法:磷酸钙共沉淀原理:该法可用于瞬时或稳定转染。然而因其对pH、温度和缓冲液盐浓度的微小变化十分敏感,所得结果容易出现差异,且对许多类型的细胞培养物(尤其是原代细胞)具有细胞毒性,转染效率较差。实验步骤:将核酸与氯化钙在磷酸盐缓冲液中混合,同时控制好pH、温度等条件→室温孵育,生成浓缩DNA的极小不溶性颗粒沉淀→将颗粒型沉淀分散到细胞中,促进DNA粘附在细胞表面→共沉淀通过内吞作用进入胞浆→分析细胞瞬时基因表达或者选择稳定性传染。加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。开封细胞高效转染试剂推荐厂家

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细胞转染效率低下的几个大坑:1.不注意细节在转染之前更换一次37℃预温的培养基,可提高转染效率。脂质体和DNA/RNA混合物应当一滴一滴地滴下来,从培养皿一边滴到另一边,边滴边轻摇培养皿,以确保均匀分布和避免局部高浓度。这些都是一些细枝末节,但是,如果不注意的话,也会造成转染效率低下。2.细胞状态不好细胞状态不好,会导致转染效率低下。一般进行转染的细胞应该处于对数生长期。如果是贴壁细胞的话,贴壁率应该在70-80%;如果是悬浮细胞的话,应该是6X105个/孔(24孔板),一般是转染前现在换液,转染前用无血清培养基或PBS洗细胞一次。转染的整个过程都不应该有物品。杭州长沙细胞高效转染试剂

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