天津鼠尾胶原产品介绍
使用方法:1、细胞培养器皿的表面包被:以包被浓度为2μg/cm2为例,用无菌0.006mol/L乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/mL。加到相应的培养器皿中,确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面。开盖在超净台上过夜晾干,也可以在室温放置1小时后,用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三个月以上的时间。2、三维胶原凝胶的制备:A、无细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)将200μL本品加到置于冰浴的离心管中,加入690μL双蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入100μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。碱法提取胶原蛋白常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等。天津鼠尾胶原产品介绍
鼠尾胶原胶凝程序:胶原蛋白I按以下步骤使其pH达到碱性时凝胶。1)将无菌5cm左右的纱布海绵贴在150mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。用氢氧化铵使纱布饱和,把盖子放在150mm的培养皿上,暂放置一边。2)将胶原蛋白I均匀涂布在要包被物的表面上,厚度可以根据需要改变,胶原蛋白I(50-100μL)足以涂覆22mm的盖玻片。对于直径100mm的培养皿,每个加入约6mL;对于60mm培养皿添加约2.3mL,对于35mm培养皿添加约1mL。3)将涂有胶原蛋白的盖玻片或带有盖子的培养皿转移到氨蒸气室并暴露三分钟。4)在无菌蒸馏水中(35mm培养皿加5mL,60mm培养皿加10mL等)浸泡涂布的盖玻片或培养皿30min。吸取原蒸馏水并加0.5-1.0mL无菌蒸馏水,放置在层流罩中过夜。5)吸出蒸馏水,用含血清的平衡盐缓冲液溶液代替并保存在2-8°C。深圳鼠尾胶原进货价通常情况下骨质总量中的钙、镁、磷等无机物质光占总量的百分之几而胶原蛋白等有机物质却要占超过80%。
一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法:1.用0.03〜0.06mol/L的柠檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,调节pH=6.5,用的3〜6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中,不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出,4°C沉淀10小时,去除上清液,去除上清液,絮状溶液高速冷冻离心处理,收集沉淀;2.用0.03〜0.06mol/L的柠檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,调节PH=6.5;溶液依次通过阳离子交换树脂、阴离子交换树脂进行脱盐处理;(8)将脱盐后的胶原蛋白溶液,-40至-20°C预冻2〜4小时,然后真空冷冻干燥,冻干产品经进一步处理得到含水率在3%以下的胶原蛋白微粉,灭菌、包装,得到成品胶原蛋白粉末。
一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法:一般的生物体中提取的胶原蛋白多为混合型,之前多从牛皮、猪皮、牛腱中提取,但这类胶原蛋白不光有油脂等其他杂质,也存在着II型及其他一些胶原蛋白亚型;同时,这种畜牧业大量饲养的动物存在着例如疯牛病等一些生物性疾病及病毒传染,如果用此开发医用产品更加存在着品质的不稳定及潜在的风险及危害;再次,人的真皮中主要含有I型和III型,但III型不易大量获得,故应用单一的I型胶原蛋白是解决体外应用的医用产品引起的抗原性问题的关键,这也是I型胶原蛋白抗原性低的原因之一。同时,I型胶原蛋白的三重螺旋的氨基酸结构决定了它的一些特有的性能,如机械性能、促进细胞生长、弱抗原性、可生物降解性和胶原的自缔合性。制备鼠尾胶原:离心,4000转/分,10-15分钟。
鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对角膜上皮细胞增殖的影响:目的探讨鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对体外培养角膜上皮细胞增殖的影响。方法采用鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶作为基质包被培养器皿,以普通培养器皿作对照,培养角膜上皮细胞,观察细胞形态,进行细胞计数并描绘细胞生长曲线,比较不同基质对角膜上皮细胞的增殖作用。结果使用基质包被的培养器皿培养角膜上皮细胞,细胞增殖速度较普通组快,细胞形态、活力和长势比普通组更佳,促进增殖的能力为鼠尾胶原多聚赖氨酸明胶。结论鼠尾胶原可促进角膜上皮细胞增殖,且增殖效果优于多聚赖氨酸和明胶。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。深圳鼠尾胶原进货价
胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了产率和生物相容性,降低了成本,适用于生物医用材料。天津鼠尾胶原产品介绍
胶原蛋白分离提纯实验方案:提取鼠尾胶原蛋白的实验步骤:1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液对初步处理的鼠尾腱进行酶解,持续一段时间待混合物变成无色、透明、粘稠液体后即可在4℃,5000g的离心力下离心20min,收集上清即为粗制鼠尾胶原蛋白原液。2、将一定浓度的氯化钠溶液加入其中,持续搅拌直至白色絮状沉淀从溶液中析出,继续加入氯化铵直至沉淀不在析出为止,4℃,5000g的离心力下离心20min后获得白色沉淀。沉淀物加入一定浓度的醋酸溶液中溶解。3、将溶解后的鼠尾胶原蛋白溶液继续反复进行盐析处理,重复步骤2的过程2~4次。_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x005f_x000c_鼠尾胶原蛋白经SDS-PAGE蛋白质电泳。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。天津鼠尾胶原产品介绍
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