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是从侧面展示的压迫元件插入椎间孔的结构示意图。图3是术后大鼠四肢表现情况。图4是术后28天大鼠的双下肢缩足阈值变化曲线图。图5是重复经颅磁刺激对大鼠背根神经压迫模型的影响。具体实施方式以下通过具体的实施例对本发明的技术方案做进一步的描述。以下的实施例是对本发明的进一步说明,而不是限制本发明的范围。实施例1、模型的制备1、腹腔注射1%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮肤,俯卧位固定于动物手术台上,铺无菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左侧作一2-3cm纵行切口,切开皮肤,钝性分离椎旁肌至横突上方,暴露腰4椎间孔,腰5椎间孔(椎旁肌可用自制拉钩保持分离状态)。3、将2根***端11为4mm,第二端12为2mm,直径为,第二端12置于腰4椎间孔及腰5椎间孔外。如图1和2所示,可以看到腰4锥体1、腰5锥体2、腰6锥体3、l型棒10、腰4神经根4和腰5神经根5的位置关系。当l型棒10的***端11插入腰4锥体1的腰4椎间孔后,会对腰4神经根4起到压迫作用;同样的,当l型棒10的***端11插入腰5锥体2的腰5椎间孔后,会对腰5神经根5起到压迫作用。从而达到模拟腰椎间盘突出压迫神经根的目的,制备得到大鼠慢性背根神经压迫模型~利用动物疾病模型来研究人类疾病可以克服平时一些不易见到不便于在病人身上进行实验的人类疾病的研究。嘉定区提供疾病动物模型建模
pirb在轴突生长锥表达,位于富含肌动蛋白的前缘和synapsin免疫阳性的囊泡中,在神经元突起的表达呈点状分布。文献表明,pirb表达随年龄增加,特别是在老龄认知损伤的小鼠海马中,pirb能够抑制轴突再生和突触可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚体对海马长时程增强的破坏作用需要pirb的参与,在ad转基因模型中,pirb不仅参与成年小鼠记忆缺失,而且介导幼年小鼠视皮层突触可塑性的丢失。这些研究提示我们,pirb参与突触可塑性,抑制pirb可能对ad起到效应。金山区口碑好的疾病动物模型建模上海东寰在动物建模方面已经有了多年的技术经验。
1、动物模型名称:卵清蛋白联合氢氧化铝致支气管豚鼠模型2、实验动物种属:豚鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:7~8周龄5、实验动物体重:250~350g6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:卵清蛋白联合氢氧化铝诱导。每只豚鼠腹腔注射100µg卵清蛋白(OVA)+30mg氢氧化铝(Al(OH)3)致敏。次致敏后第5天再致敏1次,共2次。一次致敏后第21d开始采用超声雾化器喷雾10μgOVA/只,豚鼠置于一直径约50cm的有盖大圆盆中,给药过程中对盆内通O2。
具体实施方式下面结合附图和具体实施方式对发明作进一步阐述。本发明构建了pirb基因敲入的小鼠动物模型,将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内。具体来说,构建一个cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,将其克隆进入rosa26基因的内含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七号染色体。本发明pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法,具体按照以下步骤具体实施:步骤1、根据小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher软件在1号内含子设计grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因组数据库基因,采用crispr脱靶效应软件cas-offinder检测潜在的脱靶位点:**终选取两个grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg将grna1和grna2分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构;步骤2、利用c57bl/6小鼠文库bac克隆,通过pcr扩增获得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法构建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的质粒打靶载体,通过酶切、pcr及测序对打靶质粒载体进行验证,图1为构建好的pirb基因打靶载体的示意图。疾病动物模型建模公司哪家好?
1、动物模型名称:高脂饲料致高脂血症大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g1、实验方法:大鼠给予高脂饲料喂养20天。分别于造模前和造模20天,测定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量2、检测标准:造模20天后模型组大鼠血清TC、TG、HDLC、LDLC均增加,与对照组比较具统计学差异。1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。2.根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料.可以简化实验操作和样品收集。崇明区面瘫疾病动物模型建模
确定研究疾病目的了解影响疾病发生的内在与外在因素。嘉定区提供疾病动物模型建模
f1代小鼠southern印记的5’探针引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印记的目标片段大小如下:5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步骤c、采用限制性内切酶bamhi和avrii对dna进行切割;琼脂糖凝胶电泳分离dna;步骤d、将dna转到尼龙膜上;步骤e、探针变性后,与dna分子进行杂交,nbt/bcip化学显色法显色,拍照观察。southern杂交结果如图6所示,可以看到:6、8、9号pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割,在,wt小鼠只在,如果被avrii切割,pirb基因敲除小鼠在,wt小鼠只在。步骤6、将f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子pirb基因敲入小鼠,即为本发明所述小鼠pirb基因敲入的动物模型。将本发明获得的动物模型f2代纯合子小鼠与同品系小鼠组织/细胞特异性cre表达的小鼠杂交,获得f3代小鼠,可以实现在不同组织或者细胞类型中敲入pirb基因。对f3代小鼠进行基因型的鉴定:含有无(pirb-cwt)、一个(pirb-chet)或者两个。嘉定区提供疾病动物模型建模
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