江苏提供EdU细胞增殖检测试剂盒价格
细胞增殖分析是细胞生长和分化研究的关键,在药物开发阶段常用来评估化学药物的毒性和对细胞生长的控制作用。通常根据平均DNA含量或细胞代谢参数进行细胞增殖检测,此类分析可以报告出总细胞数目和活细胞数目,或者测定出单个细胞内的DNA合成情况。细胞增殖染料稀释分析主要基于细胞膜通透性,荧光团分子、染料进入细胞后,将会共价结合到蛋白质上的氨基基团上,从而使染料能够长时间停留在细胞中。经过之后的细胞分裂阶段,各个子代细胞会从母细胞中接收到大约一半的荧光染料。采用流式细胞仪对荧光强度进行分析,即可测定出自标记结合起,单个细胞或细胞群所经历的传代数目。EdU细胞增殖检测试剂盒的作用是什么?上海东寰告诉您。江苏提供EdU细胞增殖检测试剂盒价格
细胞增殖虽然与多种因素有关,比如细胞代谢活性、与细胞增殖相关的蛋白表达、ATP的浓度等等,但是检测细胞增殖现象的直接准确的方法就是用荧光探针直接检测遗传物质DNA的合成,这种方法是研究细胞增殖、信号通路、DNA修复及分化等等方向常用的方法。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度江苏EdU细胞增殖检测试剂盒厂家上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒对如今市场的影响。
细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液,室温培养30分钟,弃固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5分钟,以中和过量的多聚甲醛;(c)弃甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测
EdU细胞增殖检测方法不需要剧烈的DNA变性操作,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,更适合结合其他染料或蛋白标记(如P65抗体)等进行多重标记,从而在细胞水平获取更多的直观多维特征信息,更适合深入开展细胞功能方面的研究。该方法无需DNA变性,无需抗原修复,无需抗原抗体反应,简单、灵敏、快速、准确,适合各种细胞系的细胞增殖检测,尤其适用于各种细胞系的高通量筛选实验,如在药物筛选中检测加药后细胞增殖变化。EdU细胞增殖检测试剂盒的重要组成部分。
通过检测EdU标记便能准确地反映细胞的增殖情况。与BrdU检测方法相比,EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)即可有效检测,可有效避免样品损伤,在细胞和组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象。EdU法检测试剂盒是Brdu方法的**性突破。EdU(5-溴-2-脱氧尿嘧啶)试剂盒是一种嘧啶类似物,可以在DNA合成期整合入DNA双链。通过以上原理图的对比,大家不难发现,EdU法检测细胞增殖,无须抗体,无变性步骤,保持细胞形态和DNA完整性,是一种简单,可靠,省事的创新方法使用EdU细胞增殖检测试剂盒的好处有哪些?浙江哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒价格
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通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留。注:贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。江苏提供EdU细胞增殖检测试剂盒价格
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