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步骤3、pmsg处理c57bl/6雌性小鼠(6周龄,平均体重20g),46h后注射hcg,与雄性小鼠合笼交配,次日取受精卵进行显微注射,将步骤1的grna1、grna2、cas9蛋白以及线性化后的打靶载体一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠体内,产出小鼠,即f0代小鼠。上述步骤中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl,cas9蛋白购自newenglandbiolabs,货号为m0386m。步骤4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr扩增产物测序,鉴定是否为嵌合体。本发明用于f0代小鼠pirb基因pcr鉴定的特异性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1对应的扩增产物大小为,primers2对应的扩增产物为。用于f0代小鼠测序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。疾病动物模型建模厂家。无锡皮肤疾病动物模型建模
1、动物模型名称:高脂饲料致高脂血症大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g1、实验方法:大鼠给予高脂饲料喂养20天。分别于造模前和造模20天,测定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量2、检测标准:造模20天后模型组大鼠血清TC、TG、HDLC、LDLC均增加,与对照组比较具统计学差异。1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。2.根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料.南通疾病动物模型建模优势确定研究疾病目的了解影响疾病发生的内在与外在因素。
1、动物模型名称:卵清蛋白联合氢氧化铝致支气管***豚鼠模型2、实验动物种属:豚鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:7~8周龄5、实验动物体重:250~350g6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:卵清蛋白联合氢氧化铝诱导。每只豚鼠腹腔注射100µg卵清蛋白(OVA)+30mg氢氧化铝(Al(OH)3)致敏。***次致敏后第5天再致敏1次,共2次。***一次致敏后第21d开始采用超声雾化器喷雾10μgOVA/只,豚鼠置于一直径约50cm的有盖大圆盆中,给药过程中对盆内通O2。2、检测标准:使用OVA喷雾激发后症状观察,豚鼠出现不同程度的呼吸急促、咳嗽、抓痒、甚至抽搐等支气管***症状,表明成功构建了豚鼠***模型。
图2是从侧面展示的压迫元件插入椎间孔的结构示意图。图3是术后大鼠四肢表现情况。图4是术后28天大鼠的双下肢缩足阈值变化曲线图。图5是重复经颅磁刺激对大鼠背根神经压迫模型的影响。具体实施方式以下通过具体的实施例对本发明的技术方案做进一步的描述。以下的实施例是对本发明的进一步说明,而不是限制本发明的范围。实施例1、模型的制备1、腹腔注射1%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮肤,俯卧位固定于动物手术台上,铺无菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左侧作一2-3cm纵行切口,切开皮肤,钝性分离椎旁肌至横突上方,暴露腰4椎间孔,腰5椎间孔(椎旁肌可用自制拉钩保持分离状态)。3、将2根***端11为4mm,第二端12为2mm,直径为,第二端12置于腰4椎间孔及腰5椎间孔外。如图1和2所示,可以看到腰4锥体1、腰5锥体2、腰6锥体3、l型棒10、腰4神经根4和腰5神经根5的位置关系。当l型棒10的***端11插入腰4锥体1的腰4椎间孔后,会对腰4神经根4起到压迫作用;同样的,当l型棒10的***端11插入腰5锥体2的腰5椎间孔后,会对腰5神经根5起到压迫作用。从而达到模拟腰椎间盘突出压迫神经根的目的,制备得到大鼠慢性背根神经压迫模型。动物疾病模型广泛应用于新药靶点发现及筛选。
1、动物模型名称:固定制动致制动应激大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:采用固定制动方法。大鼠每天固定5~6小时进行制动应激,连续制动40天。2、检测标准:模型组大鼠体重增长速度较正常对照缓慢;旷场试验的结果显示,造模结束时与正常对照组比较,模型组大鼠的水平穿越格数、垂直运动次数、理毛时间均减少,**格停留时间、粪便粒数均增加;ELISA的结果显示,造模结束时与正常对照组比较,模型组大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明显增高。模型应适用于多数研究者使用,容易复制,实验中便于操作和采集各种标本。普陀区泌尿疾病动物模型建模
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来源:ZSCI基础研究中如果加入动物实验部分则使得研究更加趋于完善,投稿时中稿率也相应会增加。但将动物实验做好却不是一件容易的事情。这篇文章主要讲动物模型的构建技术,把骨科、糖尿病相关的动物模型构建做了一个***的技术汇总,建议先码后读,文章内容有部分做了简化,想看详细讲解可以在文末获取课件!一、骨科相关动物模型1.骨关节炎1)骨关节炎模型构建方法(诱发性)-关节腔内手术法、关节腔注射法。2)模型评分标准①SafraninO染色与OARSI评分(PMID:31046827、30942801)②HE染色与OARSI评分(PMID:30609097)③SafraninO染色与Mankin评分(PMID:30609097)2.骨质疏松症1)骨关节炎模型构建方法去趋法模型PMID:31037128实验动物:小鼠方法:在戊巴比妥麻醉下进行双侧卵巢切除术以诱导骨质疏松症,同时对照组小鼠*进行卵巢外置但未切除。2)模型检测指标(PMID:31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相关指标检测3.类风湿性关节炎类风湿性关节炎(RA)是一种慢性自身免疫性疾病状态,其特征是滑膜增生,软骨退化和脊椎关节的骨侵蚀4.强直性脊柱炎1)强直性脊柱炎模型构建方法2)模型检测指标。无锡皮肤疾病动物模型建模
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