普陀区生殖疾病动物模型建模

本能发明的另一目的是公开了如上所述的方法制备的鼠慢性背根神经压迫模型的用途是将该模型用于腰椎间盘突出***方法研究和/或影像学检测研究。进一步地，该模型用于与磁性相关的***和/或检测方面的研究，比如经颅磁刺激和核磁共振。本发明利用压迫元件插入腰椎椎间孔，模拟腰椎间盘突出后突出物对神经根的持续慢性的机械压迫症状，有益效果有：1.应用机械压迫神经根模拟腰椎间盘突出病理，症状的病因学与临床情况接近；2.相关的疼痛行为类似于特定的慢性疼痛症状，且易于客观测量；3.制备方法简单，对动物损伤小，稳定性好，成功率高；4.造模关键材料压迫元件不受磁场干扰，无在磁场作用下移位风险，有利于后续对动物进行磁疗，经颅磁刺激等***及核磁共振等检查；5.造模关键材料压迫元件不影响磁场，不会对***仪器和核磁共振等仪器产生不良影响；6.此方法获得的模型由于采用了h62黄铜或聚乳酸材料制备的压迫元件，使得研究方法与检测方法不受磁场作用限制，丰富了腰椎间盘突出临床前研究的***方法及影像学检测，为临床研究提供理论依据。以下将结合附图对本发明作进一步说明，以充分说明本发明的目的、技术特征和技术效果。附图说明图1是压迫元件插入椎间孔的结构示意图。上海东寰提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。普陀区生殖疾病动物模型建模

f1代小鼠southern印记的5’探针引物如下：primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印记的目标片段大小如下：5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步骤c、采用限制性内切酶bamhi和avrii对dna进行切割；琼脂糖凝胶电泳分离dna；步骤d、将dna转到尼龙膜上；步骤e、探针变性后，与dna分子进行杂交，nbt/bcip化学显色法显色，拍照观察。southern杂交结果如图6所示，可以看到：6、8、9号pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割，在，wt小鼠只在，如果被avrii切割，pirb基因敲除小鼠在，wt小鼠只在。步骤6、将f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子pirb基因敲入小鼠，即为本发明所述小鼠pirb基因敲入的动物模型。将本发明获得的动物模型f2代纯合子小鼠与同品系小鼠组织/细胞特异性cre表达的小鼠杂交，获得f3代小鼠，可以实现在不同组织或者细胞类型中敲入pirb基因。对f3代小鼠进行基因型的鉴定：含有无(pirb-cwt)、一个(pirb-chet)或者两个。苏州成瘤疾病动物模型建模模型应适用于多数研究者使用，容易复制，实验中便于操作和采集各种标本。

    代谢组学的研究对象大都是相对分子量在1000以内的小分子物质，因此常用的血液样本在取样后，应小心操作，防止溶血，尽快分离出血清，分置于温环境下保存。由于用于病理实验的动物组织采集相对其他样品的采集，操作更繁琐，在处理过程中许多细节容易忽略，造成数据不完美（甚至不能用）。因此接下来将重点介绍组织样品采集的注意事项及其固定。组织样品采集注意事项组织应新鲜，操作时间尽可能短，否则细胞发生死后变化、自融及现象。是动物心脏还在跳动时采集，样本取出后在5分钟以内置于固定液内，避免长时间暴露在空气环境中。组织块尽量小而薄。组织块的厚度以不超过5mm为宜，较为理想的厚度为2mm左右，主要目的是使固定液迅速而均匀的渗入组织块内部。勿使组织块受挤压。在采集过程中，应尽量选择较为锋利的手术器械，如手术刀片等，避免操作过程中挤压挫伤标本。挤压过的组织均不可用。固定液的量一般以组织块大小的20倍为宜，组织能够在容器内自由移动。尽量保持组织的原有形态。新鲜组织经固定后，或多或少产生收缩现象（如胃肠），为此可将组织展平，以尽可能维持原形。保持组织清洁。组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用生理盐水冲洗。

动物模型名称：胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：5周5、实验动物体重：200~220g6、实验动物环境：SPF级1、实验方法：用胆管结扎法。大鼠按10mg/kg体重腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉，腹部皮肤消毒，无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔，分离出胆管，在胆管近端和远端2处结扎胆管。手术后正常饲养28天。28天后解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准：肝脏病理切片镜下小胆管伴纤维组织增生积分按程度为0-3分：0分：无明显病变；1分：呈局灶性分布，受累面积在30%以下者；2分：呈多灶性分布，受累面积在30%-70%之间者；3分：呈弥漫性分布，受累面积在70%以上者。开展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步结果与生物学信息资料等相关知识间的差距！

实验期间每天进行阴道涂片，观测动情周期变化。进一步地，检测***水平是指：检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地，检测对比卵巢重量是指：比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地，阴道涂片是指：采用阴道脱落细胞涂片法，使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型，为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。附图说明图1：e2水平检测结果示意图。图2：fsh水平检测结果示意图。图3：lh水平检测结果示意图。图4：大鼠体重检测结果示意图。图5：大鼠卵巢重量统计示意图。图6：动情周期检测(光镜下10倍)示意图，其中，a、b、c、d依次为：动情前期，动情期，动情后期，动情间期。图7：he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图，其中，a、b、c、d依次为：空白组，2mg组，4mg组，6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下小鼠疾病建模请找上海东寰。虹口区Balbc裸鼠疾病动物模型建模

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动物模型名称：皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雌雄不限4、实验动物年龄：成年5、实验动物体重：160-200g6、实验动物环境：SPF级1、实验方法：热力致皮肤损伤法。麻醉大鼠，根据体重腹部备皮，然后固定于实验台上。将大鼠移近加热纯净水的烧杯，将纱布条浸入热水中，待水温恒定于99℃时，取出纱布，立即平铺于待烫部位，于纱布接触大鼠皮肤后开始计时。致伤3s为浅II°烫伤，致伤10s为深II°烫伤。2、检测标准：a.皮肤大体观察：致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好，有少量红褐**素沉着，皮肤轻微挛缩，表皮光滑；致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好，皮肤瘢痕形成，表面粗糙不平。b.皮肤组织病理学观察：致伤3s大鼠表皮层次尚清楚，细胞明显肿胀、变性，层次结构尚清楚，细胞核结构不清；致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落，结构不清，明显变性、坏死，部分细胞已溶解普陀区生殖疾病动物模型建模