宁波8umNEST细胞小室TC处理

时间:2023年03月22日 来源:

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NEST细胞小室使用时先将培养液加入到多孔板的孔中,将嵌套放入,再将含有细胞的培养液加入嵌套内部;·预先平衡:培养液加入到多孔板中,再加入嵌套,然后放入培养箱中培养至少一个小时,也可以过夜;·定期检查培养液体积,并按需补加新鲜培养基。·但细胞层可以用基本细胞学方法在嵌套中直接固定和染色。注避免使用可以溶解PC膜的溶剂。·在嵌套中直接固定和染色细胞,可以用解剖刀将膜割下做长期保存。注意事项:在通透性支持物(膜)上生长的细胞的贴附对于起始接种密度很敏感,所以初次使用应接种不同密度保证比较好生长;·培养过程中通过上层和孔之间的空隙取液、加液时一定要小心、缓慢操作、避免膜的损坏;·在培养细胞之前将通透性支持物在培养基中孵育可以改善细胞的贴附和分布。·下层培养液和小室间常会有气泡产生,一旦产生气泡,下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失,所以在接种细胞的时候要特别留心,若产生气泡,要将小室提起,去除气泡,在将小室放进培养板。

细胞小室在细胞实验中很常用,如:共培养实验、趋化实验、细胞迁移实验、细胞侵袭以及药物转运。其中,通透性支持物可以有效改善极性细胞的培养,因为这些支持物允许细胞从其基底面和顶面分泌和吸收分子,从而以更为自然的方式进行代谢,很大程度的模拟体内环境以培养某些特殊的细胞系。聚碳酸酯(PC)膜孔密度较高,允许通过膜完成更多交换,而且具有较好的细胞粘附特性,所以适用于转运研究和其他需要实现比较好细胞生长的应用。另外PC膜也非常适用于屏障分析。在较长时段内相比其他膜材料,具有更高、更持续且更稳定的跨上皮电阻(TEER)值。PC膜无需基质包被即可培养大多数类型细胞。PET膜孔密度较低,具有更好的光学清晰度,有利于显微镜细胞观察以及细胞成像。NEST细胞小室有PET膜未处理的。

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