浦东新区土壤基因组土壤DNA提取

时间:2022年05月06日 来源:

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94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例5 以二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有15 ul二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒的离心管中,混匀后静止15分钟;上磁力架吸附2分钟,吸弃上清液;加入500 ul漂洗液,混匀,上磁力架吸附1分钟,吸弃上清;

NA基因扩增子测序及分析,研究菌群分布。参考文献2:·样本类型:***种子。·样本粉碎:每管20粒种子,电动组织研磨器配合研磨杵,研磨5min。·样本DNA提取:FastDNA Spin Kit for Soil提取。·下游实验:细菌16S rDNA基因扩增子测序及分析,研究菌群分布。 相关文献:1.Campisano A ,Antonielli L , Pancher M , et al. Bacterial Endophytic Communities in theGrapevine Depend on Pest Management【J】. Plos One, 2014, 9.2.Chen X , Krug L ,Yang H , et a在线询价MP土壤DNA提取。

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8000rpm离心1分钟,上清DNA溶液转移至新的离心管中。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例2 以硅胶膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有硅胶膜的离心柱中,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)上海益启生物的土壤DNA提取询价联系方式。崇明区土壤DNA提取土壤DNA提取联系人

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1.0视为提取效果良好。土壤类型:有机营养土100mg、花坛土100mg、盐碱土250mg、沙漠土250mg。提取方法:自动化/手工、自动化/手工、自动化/手工、自动化/手工。DNA收率(ng/mg样本):130.25+4.95;196.08+3.92、19.92+0.95;24.43+0.74、11.75+0.37;13.43+0.39、2.47+0.13;2.97+0.13。A260/A280:1.84+0.00;1.98+0.02、1.86+0.01;1.85+0.02、1.87+0.02;1.90+0.01、1.85士0.00;1.91+0.03。A260/A230:1.23+0.02;1.08+0.01、1浦东新区土壤基因组土壤DNA提取

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