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什么是细胞培养:细胞培养是指从动物或植物中提取细胞,然后在人工环境中进行培养以进行科学研究。较早的细胞培养技术是在100多年前开发的,为科学的巨大突破做出了贡献。如今,它已成为全世界实验室用于研究细胞的生理学、生物化学、疾病潜在机制以及药物和有毒化合物的作用的基本工具。它也可用于在药物筛选和大规模制造生物化合物,诸如疫苗和治病性蛋白质。贮存:培养基在30℃下放置1天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3~6℃的冰箱内。中国澳门Systec培养基制备仪
微生物发酵培养基配制注意事项:①养分浓度和配比合适:微生物只有在培养基中养分浓度合适的情况下才能生长良好是合适的。当养分浓度过低时,不能满足微生物正常生长的需要。②微生物培养基pH条件控制:培养基的pH必须控制在一定范围内,以满足不同种类微生物的生长繁殖或产生代谢物。各种微生物生长繁殖或代谢产物产生的较佳pH条件不同。通常细菌和放线菌适合在7~7.5pH范围内生长,酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范围内生长。③微生物培养基原料来源选择:培养基配制时,应尽可能使用低廉易得的原料作为培养基成分。尤其在发酵行业,培养基用量大,使用成本较低原料实现产品附加价值。例如在微生物单细胞蛋白的工业化生产过程中,制糖业含蔗糖废液、乳业含乳糖废液、大豆废液工业和黑色废物、造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸盐纸浆等经常被作为培养基原料使用。④成品培养基灭菌处理、为了获得微生物的纯培养物,必须避免被细菌污染,所以对使用的设备和工作场所进行消毒和消毒。对于微生物培养基要进行严格的灭菌处理。中国澳门Systec培养基制备仪培养基一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。
培养基的脱气:必要时,在使用前将养基放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min,加热时松开容器盖子;加热后盖紧盖子,并迅速冷却至使用温度。3.添加成分的加入:对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47℃~50℃时加入,灭菌的添加成分加入前应冷却至室温,避免冷的液体会造成琼脂凝胶或形成片状物。4.培养基的弃置:所有污染和未使用的培养基的弃置应采用安全的方式,并符合相关法律法规的规定。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基较终pH之用。
配置培养基注意问题:1、根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。2、注意各种营养物质的浓度及合适配比,保持合适渗透压。3、将培养基的pH控制在适宜的范围之内,以利于不同类型微生物的生长繁殖或代谢产物的积累。4、要注意各种原料的配比,每种培养基的配比合适的配比,可以按照老师的要求去做。5、如需要加热的时候注意时间的把握。培养基,是指供给微生物、植物或动物生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生,或适当提高灭菌温度。
培养基的灭菌:一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中,如无特殊规定,即可用此法灭菌。某些热敏成分,如糖类,应另行配成20%或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50°C左右的培养基中。琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出,冷至55℃-60℃时,摆置成适当斜面,待其自然凝固。培养自养微生物的培养基应由简单的无机物组成。甘肃进口培养基制备仪
选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。中国澳门Systec培养基制备仪
高压灭菌造成培养基结焦焦化问题:在实验过程中,检测人员发现在高压灭菌后的培养基有结焦焦化现象。微生物认为造成这种现象是:控制培养基在容器中不要超过百分之八十,避免填充过多。注意控制高压灭菌时间过长(115-116度)二十分钟即可,温度不超过121度,而且灭菌后的培养基在高温环境中不要长时间存放。以上原因都会导致培养基结焦焦化。贮存:培养基在30℃下放置1天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。中国澳门Systec培养基制备仪
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