北京HEPES医院采购

在细胞培养过程中，经常少不了HEPES缓冲液。那么，HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31，化学名：4-羟乙基哌嗪乙磺酸，分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2，用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。关于HEPES缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES+NaOH，另一种是HEPES+盐。艾伟拓稳定供货HEPES！北京HEPES医院采购

生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲液都可能产生不需要的化学反应。硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑制作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris缓冲液，4℃时是8.4，37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下，其缓冲能力极为不理想。北京高纯HEPES实验室采购国内AVT稳定供货HEPES！

HEPES缓冲溶液的制备方法：一.500ml1MHEPES，pH=7.0Stocksolution的制备将19.15ghepes溶解在400ml蒸馏水中，加入0.5~1M的NaOH水溶液，调整至至少所需的pH(HePeS的有效ph范围为6.8~8.2)，然后用蒸馏水定容至500ml，在4保存。二.加入少量盐的HEPESBuffer***(500ml)用HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、0.5MNaOH水溶液调节pH，*后定容。.2HEPES缓冲盐溶液的制备将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml蒸馏水中，用0.5MNaOH调节至所需的pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。

生物缓冲剂在生物化学研究中有着重要的意义，在免疫印迹、生物芯片及生物杂交等实验及体外诊断、生物医药等行业中的应用非常***。注射级氨丁三醇缓冲液优点如下：1.Tris碱的碱性较强，所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液，应用范围广；2.Tris缓冲液对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀；3.Tris在水中溶解度高，对很多酶的反应是惰性的；4.Tris缓冲能力高，在pH7.5-9.0之间有较强的缓冲能力；5.Tris缓冲剂应用***，在生物化学、分子生物学、体外诊断、化妆品、涂料等领域发挥重要作用。GMP条件下生产艾伟拓稳定供货注射级HEPES！

前述不同缓冲溶液虽然有相似之处，同时也存在差异，主要体现为以下几点：（1）缓冲溶液应用的酸碱度环境有差异：硼酸盐缓冲溶液和Tris-HCl缓冲溶液较适合在碱性环境中使用，而磷酸盐缓冲溶液和HEPES缓冲溶液则多数情况下适宜运用在pH值为6.8~8.2左右的弱酸性、弱碱性或接近中性的环境中；（2）缓冲溶液组成有差异：硼酸盐缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液及磷酸盐缓冲溶液一般是由两种物质配置而成，而HEPES缓冲溶液则是由一种物质配制；（3）缓冲溶液发挥缓冲作用的原理有一定差异：硼酸盐缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液及磷酸盐缓冲溶液靠体系中缓冲对的电离或水解平衡移动来发挥缓冲作用，而HEPES缓冲溶液则是靠体系中平衡转化关系来发挥缓冲作用；（4）缓冲溶液发挥作用的侧重方面不同：如同是在生物药相关方面的应用，磷酸盐缓冲溶液在固体药物释放研究中应用较多。而硼砂缓冲溶液多用于液体药物如滴眼液中。Tris-HCl缓冲较多用于蛋白质、DNA等生物大分子的溶液体系中。而HEPES更侧重应用于脂质体、细胞水平的相关生化实验研究中；艾伟拓长期稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐！北京HEPES医院采购

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关于HEPES缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES+NaOH，另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下：一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH范围是6.8~8.2)，然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存。二、加少量盐的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液调节pH值，***定容。三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸馏水，用0.5MNaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。北京HEPES医院采购

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