黑龙江外泌体载药 外泌体的选择

外泌体的脂质双分子膜可以保护其在血液循环中不被降解,但是这种膜结构以及其内含各种丰富的物质,使得外泌体载药变得困难。外泌体只有保证膜结构的完整性,才能不引起免疫反应,不被MPS吞噬。目前,将药物载入外泌体的方法主要有两种:(1)前转载,在分离外泌体之前,将药物与母代细胞共培养和对母代细胞进行转染,可以让母代细胞分泌含有药物的外泌体; 主要是用转染剂将“货物”转染进入亲代细胞(或者将“货物与亲代细胞孵育”),然后收集培养基,获得载有“货物”的外泌体的过程。该方法的主要问题是合适有效的转染试剂很少,且转染试剂无法完全去除,导致转染效率低,无法排除转染试剂对实验的影响。(2)后转载,分离出外泌体之后,将药物载入外泌体。装载了连翘酯苷A(FTA)的A549来源的外泌体无论是4℃还是37℃在1周内可以稳定存在。黑龙江外泌体载药 外泌体的选择

外泌体由于在细胞通讯的过程中可以携带基因，引起了基因zhiliao研究者的广fan关注。外泌体作为基因载体与传统的病毒或非病毒载体相比，其优势在于:(1)从患者体内获取的外泌体，经载入基因后，再注入患者体内几乎不会引起免疫反应，更加安全;(2)外泌体体积很小，可以逃过网状内皮系统的捕捉，有效保护承载的基因;(3)承载基因的外泌体可以通过与目标细胞膜融合的方式，将基因类药物释放到细胞质中。而其他非病毒载体一般被受体细胞內吞后才能将基因类药物输送至细胞中的内涵体。内涵体内pH值约为5～7.2，易将基因类药物酸化、破坏，并且也有部分药物无法从内含体中逃脱出，因而，相比之下，可以进行膜融合的外泌体运载的基因类药物的转染效率更高。江苏整体项目外泌体载药实验价格比较HA修饰的牛奶外泌体载药体系可将药物靶向递送至CD44高表达的中流细胞中，提高对Dox的摄取效率。

采用外泌体作为药物载体，制备一种装载连翘酯苷A(FTA)的外泌体递药系统。细胞摄取实验的结果表明，A549细胞可以摄取FTA-Exos，并且能维持长时间的稳定，延长了半衰期，明显的提高了连翘酯苷A的生物利用度，为研究连翘酯苷A体外抗中流转移作用打下基础。经典划痕实验结果表明，FTA-Exos组对于A549细胞的迁移抑制率高达90%以上，明显高于连翘酯苷A组迁移抑制率，证实含药外泌体具有更好的体外抑制A549细胞迁移效果。成功建立了FTA-Exos药物递送系统，制备的FTA-Exos性质稳定优越，明显提高连翘酯苷A的生物利用度，并具有更好的抑制A549细胞迁移作用。

外泌体载药系统中外泌体提取的方法有很多种，有差速超高速离心法、超滤法、试剂盒提取方法、磁珠免疫法等，但单一外泌体分离方法都有其不可解决的弊端，而联合不同的分离方法可得到更纯净、更丰富的外泌体。在装载连翘酯苷A(FTA)的外泌体递药系统的功效中的研究中，采用了差速离心法和超滤法提取外泌体，先使用超滤管浓缩细胞上清液，富集外泌体，再使用超高速离心提取外泌体，缩减了离心次数和时间，提高了外泌体提取效率，且整个过程简单易操作。同时采用低温超声孵育的方法制备FTA-Exos递药系统。载带茚地那韦的外泌体给药系统用于ai滋病相关神经系统疾病的zhiliao。

外泌体载药系统的性质评估：1对外泌体进行一般性质评估的方法已有多种，包括纳米颗粒跟踪分析技术(NTA)、动态光散射(DLS)、流式细胞术、原子力显微技术(AFM)、透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)等。2细胞实验：将载药外泌体添加到相应的细胞培养基，通过培养观察、检测表达物或统计细胞凋亡率来验证载药外泌体与靶细胞的亲和力、药理作用并分析其作用机制。3动物实验：不jin可验证载药外泌体的体内药理作用，还可研究其全部或部分药动学参数。与细胞实验比较，动物实验考虑内环境、体温、免疫qing除等各种因素对载药外泌体的影响，同时还考虑个体差异的影响，从而得出更句临床意义的结论。外泌体载药系统在ai症、脑梗死和神经退行性疾病等各种疾病模型的研究中显示出理想的zhiliao效果。整体实验外泌体载药实验大概费用

外泌体载药系统的临床转化研究与非临床研究具有一定的差异。黑龙江外泌体载药 外泌体的选择

疏水性的小分子药物如紫杉醇、紫衫酚、阿霉素（DOX）、姜黄素等可以通过与分离纯化的外泌体共孵育，将药物负载到外泌体中。这种方法的载药量往往较低，通过高效液相色谱检测紫衫醇的载药量一般为7.2％，DOX的载药量一般为11.2％。为了达到高效负载药物的目的，研究人员采用了电穿孔、挤出、辅助超声、低渗透析等一系列载yao方式将疏水性卟啉化合物载入到外泌体中。研究结果显示，电穿孔法、挤出、超声、低渗透析等一系列载yao方式都可以提高卟啉化合物的载药量。尤其是超声和低渗透析方法可以提高卟啉化合物的载药量到11倍。黑龙江外泌体载药 外泌体的选择