湖南细胞样本外泌体载药
外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——聚合物沉淀法。用于分离病毒和其他的生物大分子,已有50多年历史,近几年,将其作为一种新的方法来分离外泌体。目前,市场已经有应用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌体的试剂盒,常见的是SystemBiosciences公司的ExoQuick®和ExoQuick-TC®kits,该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器,但是价格昂贵。提取外泌体的试剂盒主要成分是PEG8000(30%~50%),将试剂盒与体液或细胞培养液4℃孵育过夜,之后再低速离心。即可进行外泌体的提取,此方法实行起来较为简单。外泌体载药药物载入方式多种多样,包括被动方式和主动方式两类。湖南细胞样本外泌体载药
抗ai症药物——阿霉素(DOX)已经成功被载入外泌体中,并对其抗中流作用进行了研究。在运输DOX的研究中,Wei等选择了已经在临床上使用的未成熟的树突细胞作为母代细胞,通过化学转染使其分泌的外泌体表面含有Lamp2b,这种蛋白可以与αv整合蛋白特异性iRGD肽结合,使外泌体对DOX的运输句有靶向性。将对iRGD肽靶向的外泌体和未经靶向性处理的外泌体用DiR染料标记,并分别静脉注射入移植了人乳腺ai细胞的小鼠体内,观察到靶向的外泌体在注射30min后已经出现在中流组织处,在注射2h后外泌体的含量高,而未经靶向性处理的外泌体在注射后主要集中在肝脏,几乎很少到达中流组织处,说明对iRGD肽靶向的外泌体句有很好的靶向性。抗中流药物运输载体对中流的靶向性至关重要,靶向性强的载体可以大限度地把药物运输到中流处,发挥药物的作用。负载DOX的iRGD肽靶向性外泌体对中流的抑制效果远优于单纯的DOX。河南细胞外泌体载药实验大概费用外泌体可以通过细胞内吞的方式将紫杉醇释放到受体细胞中,提高药物对供体中流细胞的毒性。
选用来源于生物的天然药物载体细胞外泌体作为DATS的递送载体,具有多种优势:首先,外泌体可以来源于患者自身的细胞,在药物传递过程中减少了免疫原性;其次,外泌体作为一种膜结构载体,与脂质体结构类似,能够通过其表面的膜蛋白与靶细胞膜融合, 将其负载的药物直接运送到受体细胞中,避免了细胞吞噬-溶酶体途径带来的药物降解及细胞毒性等问题;此外,不同来源的外泌体因其供体细胞的差异性而呈现出不同的特性。在使用外泌体装载DATS来研究抗中流转移作用中选用外泌体的供体细胞为肺转移中流细胞B16BL6,研究表明,中流细胞外泌体的产生和释放比正常细胞明显升高,并带有宿主细胞独特的性质。
以解决临床问题而设计的句有靶向运输性能的外泌体可有效的包裹化疗药物洛铂。在探针合成表征水平上,合成后的靶向运输载体句有形态稳定,粒径大小适宜的特性,并能安全有效的装载化疗药物洛铂。合成的靶向运输载体能够有效的被细胞摄取并在细胞水平上发挥zhiliao作用;能够通过血管间隙进入到中流实质中发挥作用;能够通过iRGD的引导到达中流部位;并且在有效的提高化疗药物洛铂的zhiliao作用的同时,可明显的降低化疗药物洛铂的毒副作用。这一技术有望解决临床上化疗药物洛铂在头颈ai疾病zhiliao中的应用受限问题。药物载入到外泌体中的方式可分为两种,即外源性载yao方式和内源性载yao方式。
外泌体由于在细胞通讯的过程中可以携带基因,引起了基因zhiliao研究者的广fan关注。外泌体作为基因载体与传统的病毒或非病毒载体相比,其优势在于:(1)从患者体内获取的外泌体,经载入基因后,再注入患者体内几乎不会引起免疫反应,更加安全;(2)外泌体体积很小,可以逃过网状内皮系统的捕捉,有效保护承载的基因;(3)承载基因的外泌体可以通过与目标细胞膜融合的方式,将基因类药物释放到细胞质中。而其他非病毒载体一般被受体细胞內吞后才能将基因类药物输送至细胞中的内涵体。内涵体内pH值约为5~7.2,易将基因类药物酸化、破坏,并且也有部分药物无法从内含体中逃脱出,因而,相比之下,可以进行膜融合的外泌体运载的基因类药物的转染效率更高。外泌体载阿霉素在小鼠体内的耐受量高于游离的阿霉素,增加了阿霉素对乳腺ai和卵巢ai的zhiliao指数。湖北外泌体载药大概费用
载带茚地那韦的外泌体给药系统用于ai滋病相关神经系统疾病的zhiliao。湖南细胞样本外泌体载药
疏水性的小分子药物如紫杉醇、紫衫酚、阿霉素(DOX)、姜黄素等可以通过与分离纯化的外泌体共孵育,将药物负载到外泌体中。这种方法的载药量往往较低,通过高效液相色谱检测紫衫醇的载药量一般为7.2%,DOX的载药量一般为11.2%。为了达到高效负载药物的目的,研究人员采用了电穿孔、挤出、辅助超声、低渗透析等一系列载yao方式将疏水性卟啉化合物载入到外泌体中。研究结果显示,电穿孔法、挤出、超声、低渗透析等一系列载yao方式都可以提高卟啉化合物的载药量。尤其是超声和低渗透析方法可以提高卟啉化合物的载药量到11倍。湖南细胞样本外泌体载药
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