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(1)hepes缓冲液可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10mmol/L.(2)亦可配成100x贮存液（lmol/L），使用前取99ml培养液加入lml贮存液，**终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L（100x）hepes缓冲液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.作者：知乎用户0mmkBe国内AVT稳定供货注射级HEPES。山西cas号7365-45-9HEPES现货

在细胞培养过程中，经常少不了HEPES缓冲液。那么，HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31，化学名：4-羟乙基哌嗪乙磺酸，分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2，用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。浙江药用HEPES生产厂家国内AVT的HEPES的cas号是什么？

这是维基百科对于生物缓冲液的定义和解释，在这里我们不做过多解释。生物缓冲液有很多种，这里我们只讲常见的几种，从它们的化学性质，注意事项，具体用途到**重要的，如何确定哪种缓冲液**适合你的实验。三羟甲基氨基甲烷Tris，CAS是77-86-1，它是应用*****的缓冲液，其溶液呈弱碱性，25℃下的pKa为8.06，pH缓冲范围：7.0-9.0，广泛应用于生物化学、分子生物学、涂料等领域。储存方法：Tris缓冲液容易吸收空气中的二氧化碳，储存时需要密封。三羟甲基氨基甲烷盐酸Tris-HCl，CAS是1185-53-1，是Tris的盐酸盐形式，其溶液呈酸性。

羟乙基哌嗪乙磺酸（供注射用）（HEPES）4-羟乙基哌嗪乙磺酸（简称HEPES），分子式为C8H18N2O4S。分子结构中既含有酸性的磺酸基（－SO3H），又含有两个碱性叔胺氮，所以呈现两性，可用来配制两性离子缓冲液。该缓冲溶液一般由一定量的HEPES溶于蒸馏水中，再用氢氧化钠调节pH至适当值。其pH缓冲范围一般为6.8~8.2。缓冲溶液的浓度以及外界温度对其pH值影响不大，因此能够较长时间维持稳定的pH值。因HEPES分子中的-SO3H呈现较强的酸性，易给出H+；两个叔胺氮各含有一个孤对电子，呈现碱性，可以接受H+生成季铵盐。所以磺酸基和叔胺在水溶液中互为缓冲对。而且，单个HEPES分子中的叔胺和磺酸基也可传递H+生成内盐，即两性离子。在水溶液中，HEPES分子、内盐以及磺酸基和叔胺各自产生的离子之间因H+或OH-的转移而能够相互转化建立平衡关系，凭借该平衡关系的移动来抵御外来酸碱的影响来调节溶液pH值稳定，所以具有缓冲作用，其平衡转化关系见下图。GMP条件下生产注射级HEPES！

关于HEPES缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES+NaOH，另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下：一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH范围是6.8~8.2)，然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存。二、加少量盐的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液调节pH值，***定容。三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸馏水，用0.5MNaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。艾伟拓长期稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐！云南高纯HEPES现货

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储存方法：HEPES缓冲液在2-8℃下可保存1年。注意事项：HEPES缓冲液运输时需要加冰袋。但储存时避免冷冻，否则会有盐类物质析出。N-三(羟甲基)甲基甘氨酸Tricine，CAS是5704-04-1，是一种两性离子缓冲液，名字由Tris和glycine衍生而来，结构类似于Tris，但是高浓度具有比Tris更弱的抑制性，也是“Good”缓冲液之一，**初开发用于提供叶绿体反应的缓冲体系。Tricine的有效pH缓冲范围为7.4-8.8，pKa=8.1（25℃），常用做电泳缓冲液，以及用来重悬细胞沉淀。Tricine具有低负电荷和高离子强度的特性，非常适用于电泳分离1~100kDa的低分子量蛋白。基于萤火虫荧光素酶的ATP分析实验中，比较10种常见的缓冲液，Tricine（25mM）表现出比较好的检测效果。另外，在自由基诱导的膜损伤实验中，Tricine还是一种有效的羟自由基清除剂。作者：泰安格林化工链接：山西cas号7365-45-9HEPES现货

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