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生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统,生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲液都可能产生不需要的化学反应。硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。三羟甲基氨基甲烷:它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑制作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视,在室温pH是7.8的Tris缓冲液,4℃时是8.4,37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下,其缓冲能力极为不理想。GMP条件下生产艾伟拓注射级HEPES!山西有登记号HEPES价格
各种配制方法总结如下:一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。二、加少量盐的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液调节pH值,***定容。三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5MNaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。四川试剂级HEPESGMP条件下生产AVT稳定供货注射级HEPES。
这是维基百科对于生物缓冲液的定义和解释,在这里我们不做过多解释。生物缓冲液有很多种,这里我们只讲常见的几种,从它们的化学性质,注意事项,具体用途到**重要的,如何确定哪种缓冲液**适合你的实验。三羟甲基氨基甲烷Tris,CAS是77-86-1,它是应用*****的缓冲液,其溶液呈弱碱性,25℃下的pKa为8.06,pH缓冲范围:7.0-9.0,广泛应用于生物化学、分子生物学、涂料等领域。储存方法:Tris缓冲液容易吸收空气中的二氧化碳,储存时需要密封。三羟甲基氨基甲烷盐酸Tris-HCl,CAS是1185-53-1,是Tris的盐酸盐形式,其溶液呈酸性。
使用注射级氨丁三醇缓冲剂的注意事项:1.Tris缓冲液的pH值受温度影响大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。2.Tris缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.13.Tris在一定程度上与各种分子反应,包括RNA酶抑制剂,醛,酶,DNA以及常见金属如Cr3+,Fe3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系统中会起抑制作用,在配制过程中需考虑与其他组分之间的相互作用;4.Tris缓冲液易吸收空气中的CO2,配制的缓冲液要注意盖严密封;5.Tris缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用,需使用与注射级氨丁三醇溶液具有兼容性的电极;6.Tris缓冲液不适用于二喹啉甲酸(BCA)测定;7.吸入,摄入,皮肤吸收注射级氨丁三醇可造成伤害,操作时需戴好手套和护目镜;8.作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用注射级氨丁三醇,比较好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。艾伟拓稳定供货HEPES!
关于我们Aboutus艾伟拓(上海)医药科技有限公司是一家服务**制剂的医药科技公司,旗下产品***覆盖天然磷脂、合成磷脂、功能化磷脂、核酸递送类等细分领域,并提供诸如油酸、油酸钠、胆固醇、海藻糖(供注射用)、蔗糖(供注射用)、蔗糖八硫酸酯钾等相关辅料产品。AVT专注脂质体、脂肪乳、微纳米靶向制剂等递药体系,是国内**药企、高校、研究所等单位主要磷脂供应商。合作品牌Cooperationbrand我们的合作品牌包括日本丘比(kewpie)株式会社、日本精化(NFC)株式会社、日本岩田硝子工业株式会社、瑞士CordenPharma等**厂商,是相应品牌在中国的***代理商,全权负责中国境内的产品销售及技术支持与售后服务。艾伟拓注射用HEPES已登记?安徽现货HEPES生产厂家
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Tris-HCl缓冲液缺点:1、温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.42、pH值受溶液浓度影响较大,稀释十倍,pH值的变化大于0.1;3、对某些pH电极发生一定的干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。4、易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封。HEPES缓冲液HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。HEPES缓冲液优点:pKa值介于6.0和8.0之间;在水中具有高溶解度;具有膜不透性,不易穿透生物膜;对生化反应影响有限,可耐化学和酶解作用,且不与金属离子生成复合物或沉淀;有极低的可见光和紫外光吸收;离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;HEPES缓冲液缺点:如果将HEPES水溶液暴露于环境光下三小时,会产生细胞毒性的H2O2;HEPES水溶液必须远离光线以免影响实验结果;而配置成溶剂后,要在4℃下保存,建议在短期内使用效果更佳;HEPES粉末放置的时候一般放于干燥的室内,不能直接长时间照射阳光。山西有登记号HEPES价格
【关于我们】艾伟拓(上海)医药科技有限公司AVT.是国内一家专营磷脂类药用辅料的科技公司,旗下产品覆盖天然磷脂、合成磷脂、功能化磷脂等细分领域,并提供诸如油酸、油酸钠、胆固醇等相关辅料产品。A.V.T.专注脂质体、脂肪乳、微纳米靶向制剂等递药体系,是国内药企、高校、研究所等单位主要磷脂供应商。
【合作品牌】我们的合作品牌包括日本丘比(kewpie)株式会社、日本精化(NFC)株式会社、瑞士CordenPharma等厂商,是相应品牌在中国的代理商,全权负责中国境内的产品销售及技术支持与售后服务。
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