河南动物血液样本外泌体载药实验服务

外泌体载药系统的性质评估：1对外泌体进行一般性质评估的方法已有多种，包括纳米颗粒跟踪分析技术(NTA)、动态光散射(DLS)、流式细胞术、原子力显微技术(AFM)、透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)等。2细胞实验：将载药外泌体添加到相应的细胞培养基，通过培养观察、检测表达物或统计细胞凋亡率来验证载药外泌体与靶细胞的亲和力、药理作用并分析其作用机制。3动物实验：不jin可验证载药外泌体的体内药理作用，还可研究其全部或部分药动学参数。与细胞实验比较，动物实验考虑内环境、体温、免疫qing除等各种因素对载药外泌体的影响，同时还考虑个体差异的影响，从而得出更句临床意义的结论。间充质干细胞外泌体能递送14-3-3ζ预防顺铂造成的肾毒性损伤，具有修复肾损伤的作用。河南动物血液样本外泌体载药实验服务

抗ai症药物——阿霉素(DOX)已经成功被载入外泌体中，并对其抗中流作用进行了研究。在运输DOX的研究中，Wei等选择了已经在临床上使用的未成熟的树突细胞作为母代细胞，通过化学转染使其分泌的外泌体表面含有Lamp2b，这种蛋白可以与αv整合蛋白特异性iＲGD肽结合，使外泌体对DOX的运输句有靶向性。将对iＲGD肽靶向的外泌体和未经靶向性处理的外泌体用DiＲ染料标记，并分别静脉注射入移植了人乳腺ai细胞的小鼠体内，观察到靶向的外泌体在注射30min后已经出现在中流组织处，在注射2h后外泌体的含量高，而未经靶向性处理的外泌体在注射后主要集中在肝脏，几乎很少到达中流组织处，说明对iＲGD肽靶向的外泌体句有很好的靶向性。抗中流药物运输载体对中流的靶向性至关重要，靶向性强的载体可以大限度地把药物运输到中流处，发挥药物的作用。负载DOX的iＲGD肽靶向性外泌体对中流的抑制效果远优于单纯的DOX。湖北如何验证外泌体载药成功利用成纤维细胞样干细胞来源的外泌体装载靶向KRAS的siRNA，可以抑制胰腺ai的生长。

天然来源的外泌体含有众多内源性脂质、蛋白及核酸类物质,其自身具有一定的成药潜力,例如间充质干细胞来源的外泌体在组织修复领域获得了巨大成功。当外泌体用作递送载体时,一般还需人为装载药物。理想的载yao方法不仅要实现较高的载药效率,还应保留外泌体和药物的功能和完整性。目前,在不破坏外泌体膜完整性的情况下将药物有效载入到外泌体中仍是一个巨大挑战。现有的载yao方法可分为分泌前载药法和分泌后载药法。分泌前载药法通常将亲代细胞与药物共孵育(一般需要加转染试剂),使药物进入细胞质,细胞质中的药物通过主动或被动的方式被分选到外泌体中,然后通过合适的提取方法即可获得载药的外泌体。分泌后载yao方法是目前常用的外泌体载药策略,通常需要先分离提纯外泌体,再将药物载入其中。

外泌体作为细胞-细胞间交流的“运载工句”，外泌体在正常及疾病下都发挥着不可忽视的功能。外泌体携带的mRNA可在靶细胞中翻译；携带的miRNA对靶细胞内基因进行转录后调控；携带的蛋白成份则可在效应细胞中直接发挥作用，从而实现细胞-细胞间的远距离“通讯”。外泌体的发现，为阐明中流恶性进展机制提供了新的思路；为中流标记物，尤其是液体活检提供了新的方向；同时，作为纳米级“运载工句”，近年来其在抗中流药物载体方面的潜在应用价值也获得了越来越多的关注。树突细胞分泌的外泌体表面会表达出CD9，有利于加强外泌体与靶细胞的融合，提高外泌体对药物运输的效率。

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——梯度密度离心法。外泌体的密度在1.1~1.19kg·L-1之间,因此,可以采用密度梯度离心法来分离外泌体。该方法是将超速离心结合蔗糖密度梯度或蔗糖垫结合,原理是先除去非囊泡物质,再通过梯度密度浓缩提取外泌体,该方法可以得到相对较为纯净的外泌体。传统的梯度密度方法通常需要离心16h,但是2012年,研究者使用了62~90h才分离出某些确切囊泡,因此,该方法可能不足以沉淀所有的外泌体。如果离心时间不充足,污染物质可能和外泌体保持在相同的密度层,特别是这个密度范围又比较宽。外泌体可以通过细胞内吞的方式将紫杉醇释放到受体细胞中，提高药物对供体中流细胞的毒性。河南动物血液样本外泌体载药实验服务

外泌体载药药物载入方式多种多样，包括被动方式和主动方式两类。河南动物血液样本外泌体载药实验服务

去甲斑蝥素（NTCD）是中药斑蝥所含活性成分斑蝥素的小分子去甲基化衍生物。研究表明，NTCD能在一定程度上提高ai细胞线粒体的呼吸控制率（PCR）及溶酶体酶的活性，干扰ai细胞分裂，抑制其ＤＮＡ合成，对原发性肝ai、胃ai、食管ai、白血病、结肠ai及乳腺ai等有明显的zhiliao作用。目前NTCD在临床上主要有口服和静脉滴注２种给药途径，但由于NTCD被机体吸收后广fan分布于各组织qi官，不jin对泌尿qi官有较强的毒性，而且对胃、肠道也会产生严重的不良反应。外泌体是由细胞活化或受到一定刺激时分泌到细胞外的粒径为40-100nm的囊泡。利用外泌体包载NTCD，能使NTCD即使处在恶劣的胞外环境中，也能受到保护而不被稀释和降解，进一步延长其在生物体内的留存时长，并能逃过网状内皮系统的捕获和qing除，使中流细胞内的药物浓度增加，提高生物利用度。河南动物血液样本外泌体载药实验服务

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