辽宁外泌体质谱

血清中的miR-122和miR-145非常不稳定,将血清在4°C短期保存期间即发生降解,这可能是由外泌体的异质性所导致的。–80°C保存被公认是保存各种生物标本如尿、牛奶、血液和支气管肺泡灌洗液适宜的保存环境,虽然这样保存血浆可能产生含有大量“污染物”的外泌体。4°C保存虽然容易导致外泌体中蛋白和核酸的损失,但却能够避免冻融过程造成的囊泡破坏。外泌体虽然建议保存于-80°C环境下,但在处理或运输过程中有时很难维持这种低温条件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一种冻干法以保存外泌体,在冷冻过程中使用海藻糖作为保护剂,海藻糖可以提供生物保护作用,如稳定蛋白质、细胞膜和脂质体;减少冷冻过程中冰的形成;防止蛋白质以及外泌体的聚集;减少分离和保存过程中细胞外囊泡的损失等。应用Tim4的外泌体强结合能力，可用ELISA或FACS高灵敏度定性检测、定量分析外泌体。辽宁外泌体质谱

外泌体的miRNA或蛋白质等遗传分子与肝脏病理息息相关，在肝脏疾病诊断中可作为潜在的治理靶点或分子标志物。对外泌体的研究，将有利于阐述肝脏及其疾病的发生和发展机制，为寻求临床可用的biomarkers和开发新的治理方法提供支持。外泌体可以通过转运蛋白和miRNAs进行细胞间交流，从而作用于周围的细胞并改变肝脏的微环境。细胞内多泡体（MVBs）与细胞膜融合，释放内部的外泌体到细胞外，被其他细胞摄取，通过细胞膜融合或内吞作用释放携带的内含物，在受体细胞中调控生理活动。外泌体介导的细胞间交流可以改变瘤的生长、细胞迁移、抗病毒等生理过程。体液外泌体Dir外泌体给后续实验产生了许多障碍。

间充质干细胞存在于骨髓、脂肪、脐血、牙髓、滑膜液等部位，是一种能够自我更新的多功能干细胞。间充质干细胞通过旁分泌的形式发挥其生理功能，而外泌体作为一种细胞间传递信息的介质，在间充质干细胞的功能行使中发挥了重要作用。研究发现间充质干细胞来源的外泌体能够修复组织损伤、抑制中流生长和调节免疫响应，具有zhiliao心肌梗死、自身免疫疾病、阿尔兹海默症等疾病的潜力。另外，也有研究显示间充质干细胞来源的外泌体会促进某些中流生长。

有研究表明外泌体通过唤醒瘤相关信号通路、诱导免疫耐受、重塑细胞外基质、增强瘤细胞侵袭性和调控瘤微环境促进瘤的发生和发展，外泌体在瘤的诊断上有诸多优势：外泌体可保护其中的核酸类物质，防止其迅速降解；外泌体的形成与亲源细胞的状态密切相关；针对外泌体内容物的检测比传统的瘤标志物更具有特异性；外泌体宽泛存在于多种体液样本中，以其为基础的瘤诊断可在病情发展过程中及时监测分子标志物的变化，这种检测更易监控且样本更易收集。科学家也尝试利用外泌体的压制发病机制功能。

目前，在各种健康与疾病模型中都发现，外泌体通过分子信息传递扮演着重要的角色。外泌体还越来越多地被认为是疾病的生物标志物和预后因子，具有重要的临床诊断和治理意义。除此之外，它们还有潜力被用于临床，作为基因和药物递送的载体。健康人和多种疾病的患者会将含有不同RNA和蛋白质成分的外泌体释放到体液循环中，因其特殊性，外泌体可以作为生物标志物来对疾病进行检测。例如，从血液或尿液中分离的外泌体可以用作病症、心脏病的诊断和预后的指标。蛋白质分子在外泌体信号传递过程中起到了非常重要的作用。辽宁外泌体质谱

随着今后的研究发展，外泌体功能逐步清晰，并扩大临床应用。辽宁外泌体质谱

目前，提取外泌体的方法主要有超速离心法、PEG沉淀法，但这些方法混有非常多的杂质，必须慎重分析得到的是否是外泌体。超速离心法存在操作繁杂、回收量不稳定，不能用于定量分析、必须使用昂贵的超速离心机、无法进行多样品分析等问题。因此外泌体研究相对困难，需要尽快开发操作简单、可提取高纯度外泌体的技术。因此，日本和光着眼于巨噬细胞的外泌体受体Tim4蛋白，制备Tim4细胞外域与磁珠结合的“Tim4磁珠”。Tim4通过磷酯酰丝氨酸（PS）法特异性结合Tim4蛋白和磁珠，再经过含有EDTA的洗脱缓冲液进行分离，提取高纯度的完整外泌体。辽宁外泌体质谱

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