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    下面将结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种可用于荧光PCR扩增的快速提取全血基因组的方法中的荧光PCR扩增反应液包括浓度或含量和组分如表1。将所述的荧光PCR扩增反应液对血液样本中的管家基因***DH进行荧光PCR扩增，方法如下：将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀；然后再加入200μL核酸释放剂，涡旋1min至沉淀完全散开，5000g离心30s，弃上清；向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的血液基因组DNA；取上清液3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。所述的荧光PCR扩增程序如下。步骤①：50℃，2min，循环1次。步骤②：95℃，5min，循环1次。步骤③：95℃15s，55℃30s（收集荧光），循环40次。结果分析：平行扩增的荧光定量PCR反应中，阴性对照无扩增，说明反应体系正常，无污染。用本发明处理了10份来源不同的人血液样本，然后用人管家基因***DH引物进行荧光PCR扩增检测，结果如图1所示。 口腔拭子供人体自然腔道等部位沾取生物样本检验用。广东DNA口腔拭子

    加入20μteinaseK溶液，混匀。加入200μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，在56℃放置14min（期间颠倒混合样品数次），溶液应变清亮，若未完全变清亮，延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇，充分振荡混匀10s，此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm离心30s，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm（~13，400×g）离心2min。将吸附柱放置新的，以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50～200μL洗脱缓冲液，室温放置2～5分钟，12,000rpm（~13，400×g）离心2min，将溶液收集到离心管中，测定浓度及纯度后，取3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6，本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21～25之间，荧光扩增曲线呈典型的S型。广东核酸口腔拭子供应商家口腔拭子没有标本残量，可以加快标本过程处理。

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    同样唾液和口腔拭子中核酸提取方法与血液的提取方法相似包括以下4个过程：1.通过裂解液裂解口腔脱落细胞，释放核酸物质。2.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质，去除其他杂质。3.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。4.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。传统的提取方法由于核酸提取纯化过程耗时长，成本较高，步骤繁多，增加了基因污染的风险。因此需要一种血液、唾液和口腔拭子样本经过简单处理就可以作为模板进行荧光PCR扩增检测方法，满足科研和医学领域快速检测的要求。技术实现要素：本发明提供了一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。该发明通过快速简单处理口腔拭子和血液样本，且无需纯化可直接用于荧光PCR扩增的DNA。10分钟内即可得到应用于ARMS-PCR反应体系的模板DNA。同时优化ARMS-PCR荧光体系，在反应液中加入防污染UDG酶以及提高Taq酶稳定性的的BSA，从而实现血液和口腔拭子基因组快速荧光PCR扩增检测。该方法快速简单，成本低廉，检测灵敏，且用该方法提取的基因组与商品化试剂盒提取的基因组的检测结果相近。口腔拭子 非常大限度的样本洗脱及转移，对微量DNA样本采集尤为出色。

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展会名称：2017年德国国际医疗设备展(MEDICA)

展会位置：Hall 16 F46-A

展会时间：2017年11月13-16日

展会地点：德国杜塞尔多夫展览馆

MEDICA & COMPAMED Exhibition 2017

Booth No.:Hall 16 F46-A

Date: 13th.—16th. Nov.,2017

Address: ?Dusseldorf Exhibition Center,Dusseldorf, Germany

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