海南如何验证外泌体载药成功

时间:2022年05月16日 来源:

选用来源于生物的天然药物载体细胞外泌体作为DATS的递送载体,具有多种优势:首先,外泌体可以来源于患者自身的细胞,在药物传递过程中减少了免疫原性;其次,外泌体作为一种膜结构载体,与脂质体结构类似,能够通过其表面的膜蛋白与靶细胞膜融合, 将其负载的药物直接运送到受体细胞中,避免了细胞吞噬-溶酶体途径带来的药物降解及细胞毒性等问题;此外,不同来源的外泌体因其供体细胞的差异性而呈现出不同的特性。在使用外泌体装载DATS来研究抗中流转移作用中选用外泌体的供体细胞为肺转移中流细胞B16BL6,研究表明,中流细胞外泌体的产生和释放比正常细胞明显升高,并带有宿主细胞独特的性质。外泌体装载PTX,磷脂双分子层可直接靶向融合细胞,增加PTX的细胞内化量,提高药物zhiliao效果。海南如何验证外泌体载药成功

外泌体载药系统一直是众多研究者关注的焦点。SUN等人在早期的动物实验中对脂多糖(LPS)诱导的脓毒性休克小鼠模型进行腹腔注射含姜黄素的外泌体。结果表明,外泌体可用作kang炎药物的体内载体。自此,揭开了外泌体介导药物传递系统研究的新篇章。他们改用鼻腔内注射,结果发现,载有姜黄素或信号传导与转录激huo因子3抑制剂的外泌体可用于zhiliaoLPS诱导的脑炎症、实验性自身免疫性脑炎和GL26脑中流模型。随后又有研究者发现,向野生型小鼠静脉注射携带小干扰核糖核酸序列的外泌体,能明显抑制阿尔茨海默病zhiliao靶点β-淀粉样前体蛋白裂解酶1的表达。辽宁组织样本外泌体载药实验大概费用间充质干细胞外泌体能递送14-3-3ζ预防顺铂造成的肾毒性损伤,具有修复肾损伤的作用。

通过体外实验结果得出,负载miR-132的间充质干细胞外泌体能够明显增加内皮细胞的管腔样结构;在体内实验中,外泌体预处理的人脐静脉内皮细胞具有更强的血管生成能力。此外,在小鼠缺血心脏中植入的包载miR-132的外泌体明显增强了梗塞周围区域新血管生成并保护了心脏功能。心肌梗死后,移植MSCs的zhiliao作用也可能是由负载miR-125b-5p的外泌体改善自噬流实现的。有研究利用重组腺病毒介导miR-486基因修饰MSCs,结果发现,其能够提高MSC-Exo中miR-486的水平,而且发现高表达miR-486的MSC-Exo具有促进心肌细胞增殖、迁移以及抑制心肌细胞凋亡的作用,有望成为心脏再生修复的新策略。

外泌体直接载yao方式包括皂苷处理法、孵育法、冻融循环法、超声法和挤出法等。皂苷处理法指共培养外泌体、药物和皂苷溶液,然后通过透析膜、色谱柱纯化得到载药外泌体的方法。孵育法指药物和外泌体在适宜的条件下共培养。冻融循环法是经过冷冻、融化过程使外泌体包裹药物。超声法利用超声波使药物进入外泌体中,挤出法利用挤出机实现外泌体载带药物。其中皂苷辅助药物装载方法是直接载yao方式中常用的一种载yao方式。上述方法也存在一些缺点:孵育法操作简单,但载药量低;冻融循环法、超声法和挤出法对仪器的要求高,且可能会破坏外泌体的质膜结构造成药物泄露,终造成载药量不理想。HEK293FT来源外泌体与脂质体融合为杂交外泌体,可装载并传递靶向RunX2的CRISPR/Cas9系统至间充质干细胞中。

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——尺寸排阻色谱法。尺寸排阻色谱法时外泌体提取的一种方法,利用分子筛理论,开始是根据蛋白质分子大小分离蛋白质的色谱技术。该方法的主要优点是不需要很大的离心力,从而保证了外泌体的完整性。对比超高速离心和尺寸排阻色谱法得到的外泌体蛋白,结果显示, 尺寸排阻色谱法得到的外泌体的蛋白丰度高于超高速离心法。这些基于过滤或尺寸排阻色谱的新方法为外泌体大规模的生产和临床应用提供了可能。超滤也是根据外泌体的尺寸将其分离出来的一种方法,超滤一般被认为是外泌体分离过程中的一个准备过程,通过超滤除去大分子和小分子的蛋白质。不过连续的超滤可以分离出外泌体,和超高速离心相比,超滤不需要特殊的设备就可以较短时间内分离出外泌体。但是,超滤膜对外泌体的黏附作用会降低外泌体的产量,并且超滤过程中施加的外力可能会使外泌体变形或者破裂。外泌体载yao方法-共孵育方法适用于亲脂类药物。海南如何验证外泌体载药成功

外泌体装载姜黄素的稳定性和kang炎特点,可将其运用于脑部炎症的zhiliao。海南如何验证外泌体载药成功

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