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来源:ZSCI基础研究中如果加入动物实验部分则使得研究更加趋于完善,投稿时中稿率也相应会增加。但将动物实验做好却不是一件容易的事情。这篇文章主要讲动物模型的构建技术,把骨科、糖尿病相关的动物模型构建做了一个***的技术汇总,建议先码后读,文章内容有部分做了简化,想看详细讲解可以在文末获取课件!一、骨科相关动物模型1.骨关节炎1)骨关节炎模型构建方法(诱发性)-关节腔内手术法、关节腔注射法。2)模型评分标准①SafraninO染色与OARSI评分(PMID:31046827、30942801)②HE染色与OARSI评分(PMID:30609097)③SafraninO染色与Mankin评分(PMID:30609097)2.骨质疏松症1)骨关节炎模型构建方法去趋法模型PMID:31037128实验动物:小鼠方法:在戊巴比妥麻醉下进行双侧卵巢切除术以诱导骨质疏松症,同时对照组小鼠*进行卵巢外置但未切除。2)模型检测指标(PMID:31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相关指标检测3.类风湿性关节炎类风湿性关节炎(RA)是一种慢性自身免疫性疾病状态,其特征是滑膜增生,软骨退化和脊椎关节的骨侵蚀4.强直性脊柱炎1)强直性脊柱炎模型构建方法2)模型检测指标。上海东寰疾病动物模型建模。黄浦区疾病动物模型建模公司
可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的,但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等,可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法,检测方法等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规实验方法,检测方法等。实施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液50ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。纤维化疾病动物模型建模公司小鼠疾病建模请找上海东寰。
即为本发明构建的一种pirb基因敲入的小鼠动物模型。本发明所采用第二种技术方案的特点还在于,步骤1中得到grna1和grna2后分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构。步骤3中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl。步骤4中southern杂交采用bamhi和avrii核酸内切酶切割f1代杂合子小鼠的dna。本发明的有益效果是:本发明提供了pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法,本发明的小鼠动物模型对于pirb基因功能的研究和在体验证提供了良好的基础。分离自pirb基因敲入小鼠的细胞还可以用于研究pirb发挥调节作用的下游机制。通过pirb敲入动物模型与不同类型cre小鼠的杂交,可以用于研究ad不同***或不同细胞类型pirb的调节作用。
本能发明的另一目的是公开了如上所述的方法制备的鼠慢性背根神经压迫模型的用途是将该模型用于腰椎间盘突出***方法研究和/或影像学检测研究。进一步地,该模型用于与磁性相关的***和/或检测方面的研究,比如经颅磁刺激和核磁共振。本发明利用压迫元件插入腰椎椎间孔,模拟腰椎间盘突出后突出物对神经根的持续慢性的机械压迫症状,有益效果有:1.应用机械压迫神经根模拟腰椎间盘突出病理,症状的病因学与临床情况接近;2.相关的疼痛行为类似于特定的慢性疼痛症状,且易于客观测量;3.制备方法简单,对动物损伤小,稳定性好,成功率高;4.造模关键材料压迫元件不受磁场干扰,无在磁场作用下移位风险,有利于后续对动物进行磁疗,经颅磁刺激等***及核磁共振等检查;5.造模关键材料压迫元件不影响磁场,不会对***仪器和核磁共振等仪器产生不良影响;6.此方法获得的模型由于采用了h62黄铜或聚乳酸材料制备的压迫元件,使得研究方法与检测方法不受磁场作用限制,丰富了腰椎间盘突出临床前研究的***方法及影像学检测,为临床研究提供理论依据。以下将结合附图对本发明作进一步说明,以充分说明本发明的目的、技术特征和技术效果。附图说明图1是压迫元件插入椎间孔的结构示意图广泛应用于药效评价、转化医学等医学前沿领域。
1、动物模型名称:皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:160-200g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:热力致皮肤损伤法。麻醉大鼠,根据体重腹部备皮,然后固定于实验台上。将大鼠移近加热纯净水的烧杯,将纱布条浸入热水中,待水温恒定于99℃时,取出纱布,立即平铺于待烫部位,于纱布接触大鼠皮肤后开始计时。致伤3s为浅II°烫伤,致伤10s为深II°烫伤。2、检测标准:a.皮肤大体观察:致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好,有少量红褐**素沉着,皮肤轻微挛缩,表皮光滑;致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好,皮肤瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮肤组织病理学观察:致伤3s大鼠表皮层次尚清楚,细胞明显肿胀、变性,层次结构尚清楚,细胞核结构不清;致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落,结构不清,明显变性、坏死,部分细胞已溶解很多自发性动物模型在研究人类疾病时具有重要的价值。盐城疾病动物模型建模购买
生物医学研究的进展常常依赖于使用动物模型作为实验假说和临床假说二者的试验基础。黄浦区疾病动物模型建模公司
实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。图5:大鼠卵巢重量统计示意图。图6:动情周期检测(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:动情前期,动情期,动情后期,动情间期。图7:he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:空白组,2mg组,4mg组,6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下黄浦区疾病动物模型建模公司
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