河北如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒

与BrdU方法相比，EdU检测方法无需DNA变性，无需抗原修复，无需抗原抗体反应，更简单、更灵敏、更快速、更准确，是细胞增殖检测的比较好选择。更准确--无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免变性带来的样品损伤，确保细胞核边缘清晰完整；更简单--无需抗原抗体反应，基于小分子化学反应的检测方法，简单高效，反应单需要几分钟；更灵敏--无需抗体，检测染料单为BrdU抗体的1/500，更容易扩散，即使单个增殖细胞也能准确检测；更快速--无需过夜，省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤，完成整个检测周期单需2.5小时；更兼容--对样品几乎无损伤，更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记，能够同时检测细胞其他性状特征。EdU细胞增殖检测试剂盒给社会带来了什么好处？河北如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒

细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗药物效果等的基本方法。公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成。初使用的通过检测DNA合成来检测细胞增殖的方法是放射性标记核苷掺入法，如氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷([3H]thymidine)掺入法。细胞活性的细胞增殖检测方法，能检测到细胞的总体增殖效果，但无法检测到单个的增殖细胞。这几种方法尽管都不是检测DNA合成的，但被用于替代[3H]thymidine掺入法。上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法。江西咨询EdU细胞增殖检测试剂盒公司上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒对如今市场的影响。

    试剂盒以外自备试剂和仪器：●PBS●纯水●1%乙酸●移液器及吸头●有515nm波长的酶标仪使用方法：使用注意事项：●接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发，为了减少误差，建议培养板的四边每孔只加培养基，而不作为指标检测孔。●培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。●用水或乙酸洗细胞时充满孔后保持一会倒掉即可，也可以用排或洗板机。●OD值在1-2之间较好。以96孔板为例：1．取出培养好待测的96孔板。2．在培养基表面小心加入50μl固定液(悬浮细胞加100μl固定液)，静置5分钟后放入4℃冰箱30分钟-1小时。(贴壁细胞可弃培养基后加入用水3倍稀释的固定液；悬浮细胞必须直接加入固定液，轻加在培养液面，静置5分钟后再将平板移至4℃放置1小时，可使悬浮细胞固定在培养孔底部)。

EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU标记培养基；(b)提前将2xEdU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得lxEdU溶液，其中EdU的终浓度为10uM；注：1)我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2)配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时，弃培养基；注：1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次，毎次5分钟，以除去未掺入DNA的EdU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。EdU细胞增殖检测试剂盒使用时的注意事项。

细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物，其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中，EdU细胞增殖检测试剂盒通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性，只需温和的细胞固定化和透化处理，能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点，操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散，无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。EdU细胞增殖检测试剂盒的价格。河北提供EdU细胞增殖检测试剂盒评价

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