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细胞增殖虽然与多种因素有关，比如细胞代谢活性、与细胞增殖相关的蛋白表达、ATP的浓度等等，但是检测细胞增殖现象的直接准确的方法就是用荧光探针直接检测遗传物质DNA的合成，这种方法是研究细胞增殖、信号通路、DNA修复及分化等等方向常用的方法。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比，EdU只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内更容易扩散，不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理，有效地避免了样品损伤，有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况，具有更高的灵敏度和更快的检测速度EdU细胞增殖检测试剂盒，有哪些好处值得选择？湖北哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒公司

EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，该反应非常迅速，被称作点击反应(Clickreaction)，其反应原理参见图1。通过点击反应，新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记，从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU，在铜离子的催化发生共价反应，形成稳定的三唑环，终使细胞DNA标记上生物素等探针江西品牌EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒的应用范围。

BrdU法和BeyoClick™EdU法检测原理的比较。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗体，由于空间位阻，双链DNA须变性后才能使BrdU抗体与BrdU结合。法使用小分子标记的叠氮化物(Azide)，无需DNA变性，操作更便捷，兼容性好，检测结果更加稳定可靠。本试剂盒检测快速。相对于BrdU法，本试剂盒采用BeyoClick™EdU法检测新合成的DNA，所需时间缩短。经本试剂盒处理后，增殖的细胞呈棕色，可以用普通光学显微镜进行观察。HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果参见图3。图3.HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果图。无EdU组观察不到棕色染色(左侧一列)；EdU(10μM)孵育2小时组有明显的棕色染色(中间一列)；而用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)提前预处理0.5小时后，棕色染色减弱，说明DNA合成被抑制后，EdU的掺入被抑制(右侧一列)。

    避免反复冻融。如短时间内需多次重复使用，请于4℃避光保存，有效期半年。使用前须知该试剂是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测，适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EU后进行细胞涂片处理，固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。实验准备1、盖玻片2、1×PBS（）（用DEPC水配置）3、含TritonX-100的PBS（用DEPC水配置）4、甘氨酸溶液(2mg/ml)（用DEPC水配置）5、培养板或培养皿实验参考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培养基100μl200μl300μl500μl1ml染色反应液100μl200μl300μl500μl1ml实验步骤(以96孔板，HK2贴壁细胞为例)细胞培养取对数生长期细胞，以每孔4×103~1×105细胞接种于96孔板中，培养至正常状态。EU标记1、将细胞完全培养基中按照500：1的比例加入EU溶液，制成2×EU标记培养基；2、提前将2×EU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得1×EU溶液，其中EU的终浓度为500μM；注：1）我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2）配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；3、每孔加入300μl含EU培养基孵育细胞2小时，弃培养基。EdU细胞增殖检测试剂盒如何发挥重要作用？上海东寰告诉您。

    具有保密性的材料除外）。2、目的蛋白相应一抗：请您提供质量保证的一抗（或委托我公司准备）。抗体的使用量通过预实验后进行确认，原则上不回收使用一抗。3、阳性对照样品（尽量提供）。4、相关文献（可选）。注：若要检测磷酸化蛋白，请在2-3个月内进行，因为长时间保存的样品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而检测不到磷酸化条带。五、提交给客户结果1、预实验显色结果（TIFF格式、JPEG格式或PNG格式），预实验采取3个一抗稀释度，选取部分实验样本。2、正式实验显色结果（TIFF格式、JPEG格式或PNG格式）。3、完整实验报告。六、服务项目说明1、提供的蛋白量与待检测的目的蛋白数量有关，蛋白数量增加相应的样品量也要增加。2、每张膜样品数量为1-8个，不足8个以8个收取。9-16个样品为2张膜，17-24个样品为3张膜；以此类推。举例：7个样品，1个目的蛋白，算1张膜；有9个样品，1个目的蛋白，算2张膜；7个样品，2个目的蛋白，算2张膜，有9个样品，2个目的蛋白，算4张膜。注：以上为一般算法。如果客户样品数量需要按照组别等来进行上样时，需要重新确定每张膜的上样量及膜的张数。3、选择部分样品进行预实验，参考目的蛋白一抗说明书进行3个稀释度的预实验。EdU细胞增殖检测试剂盒的优点体现在哪？江西正规EdU细胞增殖检测试剂盒优势

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上海东寰生物科技有限公司即核苷渗入法。以前常用的核苷渗入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸类似物)法，但BrdU法的缺点是需要变性DNA后才能与抗体结合，导致了DNA双链结构的破坏，影响了其他染料的结合染色，导致染色弥散，准确性降低等问题。EdU法作为新型的核苷渗入法具有以下优点：安全—–不使用[3H]thymidine，无放射性污染。简单—–基于小分子化学反应的检测方法，简单高效，需三步：EdU孵育；细胞固定；荧光检测。无需DNA变性和孵育抗体。湖北哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒公司