江苏疾病动物模型建模
得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地,l型棒的直径为,***端长3-5mm,第二端长1-3mm。具体地,根据大鼠体重选择l型棒的直径大小:当大鼠体重在200g到不足220g范围时,采用直径为;当大鼠体重在220g到不足250g范围时,采用直径为;当大鼠体重在250g到不足300g范围时,采用直径为;当大鼠体重在300g到350g范围时,采用直径为。在另一个具体实施方式中,压迫元件为u型棒;步骤三具体为:将u型棒的***端和第二端分别插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中,得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地,压迫元件采用不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料制备而成。在一个具体实施方式中,压迫元件采用黄铜和锌的混合物制备而成。具体地,混合物为h62黄铜,即含铜量为%~%,余量为锌含量的黄铜。而铜、锌皆属于非铁磁性物质。在另一个具体实施方式中,压迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制备而成。pla是一种无毒无刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金属。h62黄铜棒或pla棒在体内,即不会受磁疗、电疗引起的磁场、电场干扰,也不会对磁疗、电疗仪器及磁共振仪器产生不良影响。早期阶段科学假说与疾病潜在药物治疗效果评价始于小鼠疾病模型构建及其实验室研究。江苏疾病动物模型建模
即为本发明构建的一种pirb基因敲入的小鼠动物模型。本发明所采用第二种技术方案的特点还在于,步骤1中得到grna1和grna2后分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构。步骤3中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl。步骤4中southern杂交采用bamhi和avrii核酸内切酶切割f1代杂合子小鼠的dna。本发明的有益效果是:本发明提供了pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法,本发明的小鼠动物模型对于pirb基因功能的研究和在体验证提供了良好的基础。分离自pirb基因敲入小鼠的细胞还可以用于研究pirb发挥调节作用的下游机制。扬州疾病动物模型建模供应商如何定义好的小鼠疾病模型?
动物模型名称:胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:5周5、实验动物体重:200~220g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:用胆管结扎法。大鼠按10mg/kg体重腹腔注射3%戊巴比妥钠麻醉,腹部皮肤消毒,无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔,分离出胆管,在胆管近端和远端2处结扎胆管。手术后正常饲养28天。28天后解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准:肝脏病理切片镜下小胆管伴纤维组织增生积分按程度为0-3分:0分:无明显病变;1分:呈局灶性分布,受累面积在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面积在30%-70%之间者;3分:呈弥漫性分布,受累面积在70%以上者。
实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。图5:大鼠卵巢重量统计示意图。图6:动情周期检测(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:动情前期,动情期,动情后期,动情间期。图7:he染色观察不同方法造模对卵泡形态的影响(光镜下10倍)示意图,其中,a、b、c、d依次为:空白组,2mg组,4mg组,6mg组。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而,本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解,在不背离本发明的精神和范围的前提下。避免了在人身上进行实验所带来的风险。
可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的,但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等,可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法,检测方法等,若无特别说明,均为现有技术中已有的常规实验方法,检测方法等。实施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液50ml加入规格为10mg的医用顺铂(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成2mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。实施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步骤如下:将%氯化钠溶液(齐鲁制药,批号:aa1a8029a)中,配制成3mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg连续腹腔注射7天。可根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料。皮肤疾病动物模型建模评价
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引起组织坏死,从而导致卵巢功能早衰。技术实现要素:针对上述现有技术,本发明提供了一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本发明根据“顺铂可诱导卵巢细胞凋亡,引起组织坏死,从而导致卵巢功能早衰”这一原理,使用不同浓度及不同方法建立了化疗性损伤卵巢早衰动物模型,并对比各种方法间的优劣性,筛选出顺铂比较好的浓度及给药时间,为筛选顺铂导致的卵巢早衰动物模型比较好剂量提供了一种操作简单,成功率高,结果可靠的实验方法。本发明是通过以下技术方案实现的:一种利用顺铂建立大鼠卵巢早衰模型的方法:将剂量为按体重一日2~3mg/kg的顺铂施用于大鼠,施用方式为腹腔注射,施用方法:连续施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。或:将剂量为按体重4~6mg/kg的顺铂施用于大鼠,施用方式为腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。进一步地,可将顺铂溶于%氯化钠溶液配置成顺铂注射液,然后注射。所述顺铂,可市场常规购买得到,比如齐鲁制药公司生产的顺铂。进一步地,注射期间每天称量大鼠体重,注射后每周称量2次;末次注射后15天,麻醉取血检测***水平,取卵巢检测对比卵巢重量。江苏疾病动物模型建模
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